МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ Xylophilus ampelinus в растениях винограда на основе полимеразной цепной реакции в режиме реального времени
виноград методика определения Xylophilus ampelinus полимеразная цепная реакция
Цель работы – обнаружение фрагментов дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бактерии Xylophilus ampelinus, являющейся возбудителем бактериального увядания, в растениях винограда с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (далее – ПЦРРВ) и предназначена для использования в лабораториях, осуществляющих контроль качества посадочного материала винограда.
Определение наличия бактериального увядания в растениях винограда, установленное в настоящей методике, основано на методе полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦРРВ), включающего одновременно амплификацию и детекцию молекул ДНК Xylophilus ampelinus.
Гибридизационно-флуоресцентная детекция и анализ накопления продуктов амплификации происходит непосредственно в реакционной смеси, что снижает возможность контаминации тестируемых образцов.
Для гибридизационно-флуоресцентной детекции в состав реакционной смеси вводятся комплементарные продукту амплификации флуоресцентные зонды – олигонуклеотиды, содержащие флуорофоры и гасители флуоресценции. На этапах элонгации цепи ДНК или отжига праймеров хромофор и гаситель пространственно разобщаются, что приводит к усилению флуоресцентного сигнала, который фиксируется оптической системой детектирующего амплификатора в режиме реального времени.
  ПЦР в режиме реального времени состоит из следующих этапов:
–  амплификации специфической целевой последовательности с помощью ПЦР в присутствии флуоресцентных зондов;
–  связывания флуоресцентных зондов в каждом цикле амплификации;
–  генерации флуоресцентного сигнала при возбуждении во время каждого цикла;
–  контроля флуоресценции сигналов оптической системой обнаружения;
–  анализа данных*
тестирование посадочного материала винограда для фитосанитарного контроля производственных ампелоценозов, выявление у саженцев латентных инфекций, мониторинг чистосортности и сортового соответствия посадочного материала,
68.37.13
Методы защиты растений от вредителей, болезней и сорняков
Виталий
Володин
Александрович
"Кандидат сельскохозяйственных наук"
"Отсутствует"
"0"
"57190215165"
"670158"
"https://www.scopus.com/authid/detail.uri?authorId=57"
"0"
РОССИЯ
Надежда
Шадура
Ивановна
"Кандидат сельскохозяйственных наук"
"Отсутствует"
"нет"
"нет"
"778059"
"0000-0002-8365-0521"
РОССИЯ
Елена
Странишевская
Павловна
"Доктор сельскохозяйственных наук"
"Профессор"
"-"
"57190218360"
"0000-0002-2840-5638"
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГБУН "ВННИИВИВ "МАГАРАЧ" РАН"
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ  НАУКИ "ВСЕРОССИЙСКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВИНОГРАДАРСТВА И ВИНОДЕЛИЯ "МАГАРАЧ" РАН"
1159102130857
ВЛАДИМИР
ЛИХОВСКОЙ
ВЛАДИМИРОВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения