Устройство для иммунохроматографической высокочувствительной и внелабораторной детекции фитопатогенной бактерии Clavibacter michiganensis, основанное на повышении интенсивности регистрируемого колориметрического сигнала за счет каталитических свойств наномаркера
Clavibacter michiganensis фитопатогенная бактерия Clavibacter michiganensis внелабораторная детекция высокочувствительная детекция иммунохроматографическая детекция
Заявленное устройство предназначено для иммунохроматографической высокочувствительной, внелабораторной и экспрессной детекции фитопатогенной бактерии Clavibacter michiganensis в экстрактах листьев и клубней картофеля. Устройство представляет собой мультимембранный композит с предварительно нанесенными и высушенными иммунореагентами (тест-полоску). В состав мультимембранного композита входят рабочая нитроцеллюлозная мембрана с предварительно нанесенными иммунореагентами, закрепленная на твердой полистироловой основе, стекловолоконная мембрана с нанесенными конъюгатом пористых наночастиц типа ядро-оболочка - Au-Pt, стабилизированных поливинилпирролидоном с кроличьими поликлональными антителами, специфичными к бактериальным клеткам С.michiganensis, мембрана для впитывания и сепарации компонентов исследуемой пробы и конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов пробы после прохождения реакции и поддержания миграции жидкости по тест-полоске за счет капиллярных сил. Отличительной особенностью заявленного устройства является то, что в качестве метки использован конъюгат пористых наночастиц ядро-оболочка - Au-Pt, стабилизированных поливинилпирролидоном с поликлональными антителами против С.michiganensis. Частицы Au-Pt обладают как оптическими, так и каталитическими (пероксидаза-подобными свойствами), что позволяет использовать их в иммунохроматографическом анализе (ИХА) как наноразмерную метку с собственным оптическими сигналом, так и для снижения предела обнаружения ИХА, основанного на повышении интенсивности окрашивания при низких концентрациях антигена в пробе за счет пероксидаза-подобных свойств наночастиц, приводящих к накоплению окрашенных продуктов окисления субстрата. Высокая устойчивость частиц к химическим ингибиторам пероксидаз (азид натрия) и температуре (до 100°С) позволяет использовать наночастицы Au-Pt для амплификации сигнала даже в пробах с высокой эндогенной пероксидазной активностью после ее нивелирования. В контрольную зону (К.З.) нанесен иммуноглобулин-связывающий белок А. В тестовую зону (Т.З.) нанесены кроличьи поликлональные антитела, специфичные к бактериальным клеткам С.michiganensis.
Полезная модель относится к детекции фитопатогенной бактерии Clavibacter michiganensis (С michiganensis) и может быть использована как экспрессное лабораторное и внелабораторное средство для проведения фитосанитарного контроля специализированными службами, таможенного контроля посевного материала, мониторинга зараженности фермерскими хозяйствами.
Борис
Дзантиев
Борисович
Зав. лабораторией иммунобиохимии
Доктор химических наук
Профессор
C-6125-2014
7006549067
78643
0000-0003-4008-4918
РОССИЯ
Алексей
Федоров
Николаевич
Директор
РОССИЯ
62.65.11
Биотехнология в растениеводстве
62.71.00
Биогеотехнология
02.08.DB
BIOTECHNOLOGY & APPLIED MICROBIOLOGY
Василий
Панфёров
Геннадьевич
разработка
РОССИЯ
Анатолий
Жердев
Виталиевич
разработка
РОССИЯ
Ирина
Сафенкова
Викторовна
разработка
РОССИЯ
Борис
Дзантиев
Борисович
разработка
РОССИЯ
Минобрнауки России
Министерство образования и науки Российской Федерации
1047796287440
Организация
Министерство образования и науки Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФИЦ Биотехнологии РАН
Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии» Российской академии наук"
1037700131633
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения