Рекомбинантные плазмидные ДНК pFLAG -sc14D5a-NLuc-r1 и pFLAG-NLuc-r2-sc14D5a, обеспечивающие синтез гибридных белков sc14D5a-NLuc-r1 и NLuc-r2-sc14D5a, и гибридные белки sc14D5a-NLuc-r1 и NLuc-r2-sc14D5a, связывающие белок Е вируса клещевого энцефалита с комплементацией фрагментов NLuc-r1 и NLuc-r2 и появлением биолюминесцентной активности
гибридные белки вирус клещевого энцефалита биолюминесцентный анализ люцифераза
Изобретение относится к биотехнологии, генной и белковой инженерии и предназначено для получения генетически слитых гибридных белков. Предложены рекомбинантные плазмиды ДНК pFLAG-sc14D5a-NLuc-r1 и pFLAG-NLuc-r2-sc14D5a, содержащие уникальный ген одноцепочечного антитела мыши, направленного против белка Е вируса клещевого энцефалита, и гены фрагментов люциферазы NLuc-r1 и NLuc-r2. Предложен гибридный белок, экспрессирующийся в трансформированных упомянутыми плазмидными ДНК клетках Escherichia coli Rosetta-gami2 с последующими выделением из цитоплазматической фракции и очисткой металл-хелатной хроматографией гибридных белков sc14D5a-NLuc-r1 и NLuc-r2-sc14D5a. Изобретение позволяет получить два гибридных белка, обладающих способностью связывать белки Е вируса клещевого энцефалита с комплементацией фрагментов люциферазы NanoLuc и возникновением биолюминесцентной активности в присутствии субстрата - целентеразина, как потенциально пригодной высокочувствительной системы для выявления вируса клещевого энцефалита в биологических образцах однофазным биолюминесцентным анализом.
медицина, диагностика вируса клещевого энцефалита
Людмила
Франк
Алексеевна
г.н.с.
Доктор биологических наук
Отсутствует
-
-
-
РОССИЯ
Андрей
Дегерменджи
Георгиевич
директор
РОССИЯ
62.61.61
Биомаркеры для диагностики. Мишени лекарственных средств
01.06.CQ
BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
Евгения
Башмакова
Евгеньевна
РОССИЯ
Александр
Кудрявцев
Николаевич
РОССИЯ
Людмила
Франк
Алексеевна
РОССИЯ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ЦЕНТР "КРАСНОЯРСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР СИБИРСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК"
1022402133698
АЛЕКСАНДР
ШПЕДТ
АРТУРОВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения