Модифицированная генетическая конструкция для рекомбинантной экспрессии и кристаллизации человеческого CysLT1 рецептора
лейкотриеновые рецепторы генетические технологии рецепторы, сопряжённые с G белком (GPCR) модификация генетических конструкций
Изобретение относится к области молекулярной биологии, генной инженерии, биотехнологиям и может быть использовано для экспрессии CysLT1 рецептора в клетках насекомых линии Sf9, его очистки методом металл-аффинной хроматографии и кристаллизации в липидной кубической фазе. Ген интереса оптимизирован под экспрессию в клетках насекомых, и помещен в плазмидный вектор pFastBac1 (ThermoFisher, США), содержащий гены устойчивости к антибиотикам AmpR, GmR, сайт множественного щепления рестриктазами MCS (в том числе BamHI, EcoRI, NotI, XhoI), T7R транспозон, полиэдриновый промотер, сигнальную последовательность PolyA вируса SV40, pUC ori, f1 ori. На N-конце белка помещены пептидные фрагменты: HA (однобуквенный код аминокислотной последовательности: KTIIALSYIFCLVFA – сигнальный пептид для встраивания экспрессированного белка в мембрану), Flag (однобуквенный код аминокислотной последовательности: DYKDDDD – для детектирования экспрессии антителами), 10-His для очистки на смоле, сайт TEV-протеазы (однобуквенный код аминокислотной последовательности: ENLYFQG). На С-конце использовался двойной ТАА стоп-кодон.
Экспрессия рецептора CysLT1 для различных биофизических и структурных исследований, скрининговых тест-систем для разработки лекарственных препаратов
34.15.15
Пространственная структура и свойства биополимеров
34.15.35
Молекулярная мембранология
34.17.05
Методы и аппаратура в биофизике
34.17.15
Молекулярная биофизика
Михаил
Шевцов
Борисович
"Кандидат химических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Петр
Попов
Анатольевич
"Кандидат физико-математических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Валентин
Борщевский
Иванович
"Кандидат физико-математических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Алексей
Мишин
Викторович
"Кандидат физико-математических наук"
"Старший научный сотрудник"
РОССИЯ
Егор
Марьин
Вадимович
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Надежда
Сафронова
Александровна
"Отсутствует"
"Младший научный сотрудник"
РОССИЯ
Анастасия
Гусач
Юрьевна
"Кандидат физико-математических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Александра
Лугинина
Павловна
"Кандидат физико-математических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Елизавета
Ляпина
Алексеевна
"Кандидат физико-математических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Минобрнауки России
Министерство образования и науки Российской Федерации
1047796287440
Организация
Министерство образования и науки Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
МФТИ
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Московский физико-технический институт (национальный исследовательский  университет)"
1027739386135
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные автономные учреждения