Способ децеллюляризации и криоконсервации роговичной лентикулы для интрастромальной кератофакии
интрастромальная кератофакия отмывание в растворе PBS роговичная лентикула криоконсервация децеллюляризация
Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано с целью проведения рефракционных вмешательств на роговице с помощью интрастромальной кератофакии, используя при этом в качестве трансплантата криоконсервированную и децеллюляризированную роговичную лентикулу. Способ децеллюляризации и криоконсервации роговичной лентикулы для интрастромальной кератофакии характеризуется тем, что в стерильных условиях инкубируют лентикулу в 1,5 М растворе хлорида натрия в течение 48 часов с заменой через 24 часа, затем лентикулу инкубируют в растворе ДНКазы 5 Ед/мл и РНКазы 5 Ед/мл в течение 48 часов, после чего лентикулу промывают в фосфатно-буферном растворе (PBS), рН 7,4, в течение 72 часов с заменой раствора PBS каждые 24 часа; на всех этапах децеллюляризации лентикулы используют непрерывное встряхивание в термошейкере при комнатной температуре; после децеллюляризации лентикулу криоконсервируют в стерильных условиях, для чего лентикулу сначала трижды по 5 минут отмывают в растворе PBS и переносят в криопробирку, содержащую 0,9 мл раствора для хранения роговицы и 0,1 мл 10% диметилсульфоксида, далее криопробирку с лентикулой помещают в контейнер для криоконсервации, который на ночь переносят в холодильник с температурой минус 80 градусов по Цельсию, на следующий день контейнер с лентикулой переносят в сосуд Дьюара до запланированной процедуры интрастромальной кератофакии, лентикулу извлекают из сосуда Дьюара и размораживают в течение 5 минут на водяной бане при 37 градусах по Цельсию, затем проводят ее трехкратный цикл отмывания в растворе PBS, после чего лентикулу переносят в операционный блок для проведения процедуры интрастромальной кератофакии. Изобретение обеспечивает создание банка роговичной ткани - лентикул, обладающих сохранностью коллагенового каркаса и отсутствием клеточного содержимого, что обусловливает их высокую прозрачность и низкий уровень иммунногенности.
Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и может быть использовано с целью проведения рефракционных вмешательств на роговице с помощью интрастромальной кератофакии, используя при этом в качестве трансплантата криоконсервированную и децеллюляризированную роговичную лентикулу.
Сергей
Борзенок
Анатольевич
РУКОВОДИТЕЛЬ ЦЕНТРА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПРИКЛАДНЫХ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРОБЛЕМ
Доктор медицинских наук
Профессор
C-1931-2017
22233607200
170746
-
РОССИЯ
Дмитрий
Арсютов
Геннадьевич
Генеральный директор
РОССИЯ
76.29.56
Офтальмология
03.02.SU
OPHTHALMOLOGY
Сергей
Борзенок
Анатольевич
руководитель
РОССИЯ
Сергей
Костенев
Владимирович
исполнитель
РОССИЯ
МИНЗДРАВ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1127746460896
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГАУ "НМИЦ "МНТК "МИКРОХИРУРГИЯ ГЛАЗА" ИМ. АКАД. С.Н. ФЕДОРОВА" МИНЗДРАВА РОССИИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "НАЦИОНАЛЬНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ЦЕНТР "МЕЖОТРАСЛЕВОЙ НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС "МИКРОХИРУРГИЯ ГЛАЗА" ИМЕНИ АКАДЕМИКА С.Н. ФЕДОРОВА" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1027739714606
АЛЕКСАНДР
ЧУХРАЁВ
МИХАЙЛОВИЧ
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные автономные учреждения