Заявка на получение патента на изобретение N 2023124621 «Рекомбинантный штамм Yarrowia lipolytica - продуцент инкапсулированной фитазы Paenibacillus sp.
Paenibacillus Yarrowia lipolytica микроинкапусуляция продуцент штамм фитат фитаза
Изобретение относится к области биотехнологии и кормопроизводства, в частности, к созданию рекомбинантного штамма Yarrowia lipolytica - продуцента инкапсулированной фитазы Panibacillus sp. RB, и может быть использовано для получения кормовых премиксов для использования в животноводстве, обладающих высокой усвояемостью органического фосфора, находящегося в зерновом сырье.
В качестве объекта для экспрессии выбрана фитаза Panibacillus sp. RB (PhyPS), которая не обладает высокой термостабильностью, подобно фитазам Bacillus pumilus и Aspergillus niger, из-за чего несовместима с технологией получения кормовых премиксов с помощью распылительной сушки. Однако, PhyPS обладает более высокой удельной активностью по сравнению с перечисленными коммерчески доступными фитазами при нахождении в желудочно-кишечном тракте животных. Благодаря удалению секреторного лидерного пептида из последовательности гена PhyPS (реализованному при конструировании плазмиды pUV3-PhyPS) продукту была придана способность накапливаться в цитоплазме рекомбинантного продуцента, а не секретироваться в среду культивирования. Показано, что по уровню термостабильности продукта он оказался пригоден для использования в кормовых премиксах для сельскохозяйственных животных, получаемых методом распылительной сушки при 70%: падение активности при кратковременном прогреве не превышало 17% от исходного.
Дополнительным преимуществом сконструированного штамма Y. lipolytica pUV3-PhyPS по сравнению с коллекционным штаммом ВКПМ Y-3852 на базе PO1f является способность расти на суспензии мясокостной муки в качестве субстрата. Таким образом, обеспечивается возможность преимущественного использования нерастворимой фракции субстрата в комплексе с биомассой продуцента в качестве источника кормового белка, тогда как растворимая фракция культуральной жидкости может быть удалена на стадии сепарации биомассы. Благодаря этому может быть достигнута существенная экономия энергии при получении кормового фермента по сравнению с традиционной технологией концентрирования, основанной на последовательном использовании вакуум-выпаривания и распылительной сушки культуральной жидкости.
1 н.п. ф-лы, 1 табл., 1 илл.
Промышленная микробиология, кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных, в том числе, птицы, свиней и рыбы, генетическая инженерия
62.37.99
Другие проблемы генетической инженерии
МАРЬЯ
ШАБУНИНА
АНТОНОВНА
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Алексей
Шевелев
Борисович
"Доктор биологических наук"
"Отсутствует"
"E-1339-2014"
""
""
"0000-0003-3564-7405"
РОССИЯ
МАРИЯ
СМИРНОВА
СЕРГЕЕВНА
"Кандидат биологических наук"
"Отсутствует"
"E-2040-2014"
"0000-0003-4659-6180"
РОССИЯ
ТХИ ХОА
НГУЕН
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
ЕЛЕНА
ТРУБНИКОВА
ВЛАДИМИРОВНА
"Доктор биологических наук"
"Доцент"
РОССИЯ
ЕЛЕНА
ЩЕРБАКОВА
СЕРГЕЕВНА
"Кандидат биологических наук"
"Отсутствует"
"0000-0003-2128-9192"
РОССИЯ
Кармен
Манукян
Гагиковна
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ИОГен РАН
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова Российской академии наук
1037739549748
Организация
Федеральное агентство научных организаций
Федеральные государственные бюджетные учреждения