Интерферометрический метод оценки нативногно состояния белков в растворе
Интерферометрия, показатель преломления, конформация белка
Разработан новый метод исследования конформационного состояния белка и его взаимодействия с растворителем. Метод основан на измерении показателя преломления белкового раствора с помощью прецизионного лазерного интерферометра с погрешностью 10−7. Произведена калибровка интерферометра на основе известных зависимостей изменения показателя преломления при изменении температуры воды и изменения показателя преломления раствора NaCl при изменении концентрации. С помощью интерферометра впервые зафиксированы изменения в показателе преломления в ходе процессов протеолиза (увеличениена 9 · 10−6 и 2.4 · 10−6 показателя преломления растворов бычьего сывороточного альбумина и яичного лизоцима при гидролизе, катализируемом пепсином) и денатурации (увеличение показателя преломления на 4.5 · 10−5 в ходе реакции яичного лизоцима с гуанидин гидрохлоридом и дитиотреитолом). На основе прямых интерферометрических измерений опровергнуто широко распространенное предположение, что показатель преломления белковых растворов определяется только концентрацией белка и его аминокислотным составом и не зависит от состояния фрагментации белка. Повышенная точность интерферометра позволяет изучать инкремент показателя преломления (dn/dc) при низких концентрациях растворенных соединений (≪ 1%), а также исследовать процессы, приводящие к изменениям конформации макромолекул в растворе.
Имеет прикладное применение в областях, где важно оценить нативное состояние белка и функциональную активность: медицина, фармакология.
Давид
Кочиев
Георгиевич
заместитель директора
Кандидат физико-математических наук
Отсутствует
A-3358-2014
7801382064
0000-0002-0816-729X
РОССИЯ
Сергей
Гарнов
Владимирович
директор
РОССИЯ
34.17.15
Молекулярная биофизика
01.06.DA
BIOPHYSICS
Сергей
Гудков
Владимирович
Общее руководство. Подготовка документации.
РОССИЯ
Руслан
Саримов
Маратович
Разработка и откладка оборудования. Подготовка документации.
РОССИЯ
Татьяна
Матвеева
Александровна
Тестирование интерферометра в экспериментах с белками.
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ИОФ РАН
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ЦЕНТР "ИНСТИТУТ ОБЩЕЙ ФИЗИКИ ИМ. А.М. ПРОХОРОВА РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК"
1027700378595
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения