Технология визуализации минимальных скоплений амилоида в образцах тканей человека при помощи флуоресцентных красителей
КОНГО КРАСНЫЙ ДИАМИНОФЛУОРЕН ДИСАЗОКРАСИТЕЛИ АМИЛОИД АМИЛОИДОГЕННЫЕ БЕЛКИ АМИДОИДОЗЫ ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ФЛУОРИМЕТРИЯ
Синтезированы азокрасители – аналоги Конго красного на основе диаминотерфенила, парафенилендиамина, диаминофлуорена, диаминоакридина, диаминоантрахинона, парааминобензойной кислоты и анилина, с одной стороны, и нафтионовой кислоты, с другой стороны. Красители очищены при помощи ВЭЖХ. Изучены физико-химические и оптические свойства полученных красителей, а также их способность связываться с фибриллами амилоидогенных белков и с тканевым амилоидом. Показано, что все красители имеют сходную окраску и способность связываться с фибриллами (лизоцима, инсулина, бета2-микроглобулиан). Однако только  производное диаминофлуорена - 2,7-бис(1-амино-4-сульфонафтил-2-азо)флуорен обладает всеми свойствами, которые позволяют использовать его для гистологических окрасок. Комплексирование с фибриллами сопровождается сдвигом максимума поглощения красителя в видимой области и возрастанием флуоресценции в красной области. Производное диаминофлуорена впервые предложено для окраски скоплений амилоида в гистологических препаратах. Показано, что при окраске полученным производным диаминофлуорена амилоид легко идентифицируется по флуоресценции в образцах тканей лабораторных животных и человека. Краситель практически не связывается с тканевыми структурами, отличными от амилоида. Протокол окраски легко осуществим и воспроизводим. Результаты изучения способности красителя выявлять амилоид в тканях больных показали перспективность и целесообразность испытания флуоренового производного в морфологических лабораториях для диагностики амилоидозов. С целью повышения чувствительности метода получено производное пара-аминобензойной кислоты, которые было использовано для получения антител к аналогам Конго красного. Антитела к Конго красному и его аналогам с остатками нафтионовой кислоты позволит выявлять амилоид при минимальных количествах связавшегося красителя.
Методические рекомендации предназначены для применения в сфере здравоохранения Российской Федерации в области гистологии и патологической анатомии с целью диагностики амилоидозов.
Александр
Суворов
Николаевич
Зав. отделом
Доктор медицинских наук
Член-корреспондент РАН
J-6921-2013
7101829979
85600
https://orcid.org/0000-0003-2312-5589
0000-0003-2312-5589
РОССИЯ
Александр
Дмитриев
Валентинович
Директор
РОССИЯ
76.29.32
Коллагеновые болезни и близкие синдромы
76.35.33
Лабораторное дело
03.01.AY
ANATOMY & MORPHOLOGY
03.01.TM
PATHOLOGY
Михаил
Шавловский
Михайлович
Основной разработчик
РОССИЯ
Ольга
Антимонова
Игоревна
Разработчик
РОССИЯ
Валерия
Гусельникова
Владимировна
Разработчик
РОССИЯ
Дмитрий
Коржевский
Эдуардович
Разработчик
РОССИЯ
ФАНО России
Федеральное агентство научных организаций
5137746009462
Организация
Правительство Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения
ФГБНУ "ИЭМ"
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины"
1037828000198
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения