Способ создания искусственного эквивалента мембраны круглого окна человека
Биологический эвкивалент Отология Биомедицинский клеточный продукт
Изобретение относится к биомедицине, может применяться при тестировании физиотерапевтических вмешательств, проведении доклинических испытаний, сокращая при этом использование животных. Способ создания искусственного эквивалента мембраны круглого окна включает следующие этапы: этап 1 – на котором коллагеновую мембрану в форме диска диаметром 1,6 ± 0,1  см и толщиной 100 ± 20 мкм в условиях стерильного бокса помещают в лунки 6-ти луночного планшета, заливают 2 мл питательной среды DMEM/F12 и оставляют на 20 минут для набухания, после чего среду удаляют пипеткой, этап 2 – на котором дермальные фибробласты человека, культивируемые стандартным способом, снимают с поверхности культуральных флаконов растворами Версена и трипсина, тщательно ресуспендируют для получения однородной одноклеточной суспензии и высевают в количестве 30000-50000 клеток на поверхность мембраны, подготовленной на этапе 1, в 100 мкл питательной среды следующего состава: среда DMEM/F12 – 89%, эмбриональная бычья сыворотка - 10%, Glutamax - 1%, этап 3 – на котором клетки линии HaCaT, культивируемые стандартным способом, снимают с поверхности культуральных флаконов растворами Версена и трипсина, тщательно ресуспендируют для получения однородной одноклеточной суспензии и высевают в количестве 100 000 клеток на подготовленную мембрану на этапе 1 или на подготовленную мембрану с фибробластами на этапе 2, этап 4 – на котором мембрану, полученную на этапе 3, культивируют на среде DMEM/F12 – 89%, эмбриональная бычья сыворотка - 10%, Glutamax – 1%, в условиях СО2-инкубатора 5-7 суток.
В результате осуществления способа создан живой эквивалент мембраны круглого окна (варианты), который соответствует человеческой мембране круглого окна по толщине клеточного слоя, структуре и проницаемости.
Изобретение относится к биомедицине, может применяться при тестировании физиотерапевтических вмешательств, проведении доклинических исследований
Изобретение может быть использовано для создания живого эквивалента мембраны круглого окна, которое соответствует человеческой мембране круглого окна по толщине клеточного слоя, структуре и проницаемости
34.57.21
Материалы для биомедицинского применения
62.33.31
Культивирование клеток и тканей человека и животных
Екатерина
Воротеляк
Андреевна
"Доктор биологических наук"
"Член-корреспондент РАН"
"I-2029-2014"
"6506992351"
"88885"
""
"0000-0001-5405-0212"
РОССИЯ
Ольга
Роговая
Сергеевна
"Кандидат биологических наук"
"Отсутствует"
"I-2348-2014"
"8284578500"
"110849"
"0000-0003-4251-9372"
РОССИЯ
АВТОНОМНАЯ НЕКОММЕРЧЕСКАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ "МОСКОВСКИЙ ЦЕНТР ИННОВАЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ В ЗДРАВООХРАНЕНИИ"
1197700015941
ВЯЧЕСЛАВ
ШУЛЕНИН
ВЯЧЕСЛАВОВИЧ
Организация
Организации, учрежденные юридическими лицами или гражданами, или юридическими лицами и гражданами совместно
Автономные некоммерческие организации
ИБР РАН
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ РАЗВИТИЯ ИМ. Н.К. КОЛЬЦОВА РАН
1027700450800
АНДРЕЙ
ВАСИЛЬЕВ
ВАЛЕНТИНОВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения