СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ КОЛОРЕКТАЛЬНОГО РАКА
специфичность чувствительность проточная цитометрия иммуно-сорбирующий комплекс АТ-кВНВ-флАТ супер-парамагнитные частицы (СПМЧ) иммуносорбция внеклеточные нано-везикулы (ВНВ) диагностика колоректальный рак (КРР) онкология
Изобретение относится к области биотехнологии и диагностической медицины и может быть использовано для диагностики колоректального рака (КРР). С этой целью осуществляют количественную оценку концентрации внеклеточных нано-везикул (ВНВ), секретируемых клетками эпителия толстой кишки и/или клетками аденокарциномы толстой кишки (кВНВ), в составе тотальной популяции ВНВ. Выделяют тотальную популяцию ВНВ плазмы, оценивают размер и концентрацию ВНВ с помощью анализа траекторий, при этом концентрация везикул должна быть в диапазоне 2х1011/мл - 8х1011/мл, мажорная фракция суспензии ВНВ  - не менее 85%, размер везикул мажорной фракции - 80–110 нм, формируют иммуно-сорбирующие комплексы, состоящие из супер-парамагнитных частиц (СПМЧ) со стрептавидином и 5 антител к маркерам дифференцировки кишечного эпителия CLRN3, GPA33, GCNT3, PIG-Y, Reg IV, меченых биотином - СПМЧ-5АТ,  комплексы СПМЧ-5АТ собирают на магнитном штативе, супернатант с несвязавшимися антителами отбирают и комплексы промывают два раза фосфатно-солевым буфером,  отмытые комплексы СПМЧ-5АТ инкубируют с образцом тотальной фракции ВНВ в фосфатно-солевом буфере на вортексе при температуре +4°С, образовавшиеся комплексы СПМЧ-АТ-кВНВ собирают на магнитном штативе, супернатант с несвязавшимися кВНВ отбирают и комплексы промывают два раза фосфатно-солевым буфером на магнитном штативе, кВНВ в составе комплекса СПМЧ-АТ-кВНВ метят антителами к общим экзосомальным маркерам CD63 или CD9, несущими флуоресцентную метку FITC или PerCP, выделяют кВНВ и оценивают их количественно в составе иммуно-сорбирующих комплексов АТ-кВНВ-флАТ методом проточной цитометрии, при этом  у пациентов с КРР фракция кВНВ составляет более 5% от тотальной популяции ВНВ плазмы. Способ позволяет диагностировать КРР с чувствительностью 0,72 и специфичностью 0,76.
Результат интеллектуальной деятельности может быть использован для диагностики колоректального рака (КРР).
Анастасия
Малек
Валерьевна
Заведующий научной лабораторией
Кандидат медицинских наук
Отсутствует
R-8804-2016
35741075000
129474
0000-0001-5334-7292
РОССИЯ
Алексей
Беляев
Михайлович
Директор
РОССИЯ
34.15.51
Молекулярная онкология
76.29.49
Онкология
03.01.QA
MEDICINE, RESEARCH & EXPERIMENTAL
03.02.DM
ONCOLOGY
Инга
Назарова
Валерьевна
Разработка технологии.
РОССИЯ
Надежда
Никифорова
Станиславовна
Экспериментальная валидация технологии.
РОССИЯ
Елена
Сидина
Игоревна
Экспериментальная валидация технологии.
РОССИЯ
Мария
Слюсаренко
Александровна
Экспериментальная валидация технологии.
РОССИЯ
Лидия
Забегина
Михайловна
Сбор и подготовка клинического материала.
РОССИЯ
Маргарита
Князева
Сергеевна
Сбор и подготовка клинического материала.
РОССИЯ
Максим
Служев
Иванович
Сбор и подготовка клинического материала.
РОССИЯ
Татьяна
Семиглазова
Юрьевна
Экспериментальная верификация технологии.
РОССИЯ
Владислав
Семиглазов
Владимирович
Сбор и подготовка клинического материала.
РОССИЯ
Анастасия
Малек
Валерьевна
Разработка технологии, экспериментальная верификация технологии.
РОССИЯ
МИНЗДРАВ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1127746460896
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова" Минздрава России
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Петрова" Министерства здравоохранения Российской Федерации
1027812406687
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения