Препарат на основе литического микобактериофага и способ его получения
Микобактерии туберкулеза микобактериофаги липосомы бактерицидность туберкулезная гранулема экспериментальная туберкулезная инфекция экспериментальная биотерапия
Объект исследования – микобактериофаги, модель туберкулезной гранулемы in vitro
Цель работы: Изучить бактерицидную противотуберкулезную эффективность различных лекарственных форм биотерапевтического препарата на основе липосомального литического микобактериофага для ускоренного лечения туберкулезной инфекции, в том числе ее лекарственно-устойчивых форм на экспериментальных моделях in vivo
Материалы и методы. Для размножения литического микобактериофага D29 готовили суспензию M. smegmatis после роста на плотной питательной среде Миддлбрук 7H10. Изучали величину оптической плотности суспензии микобактерий M. smegmatis. Препарат фага при низком уровне ионной силы (0,1 M NaCl) сорбировали на DEAE-сефарозе. С целью более избирательного транспорта микобактериофагов к очагам туберкулезного воспаления их помещали (включали) в субмикронные – 0, 45 и 0, 8 микронные везикулы – липосомы, обладающие тропностью к включению гранулематозные очаги с фагоцитарной активностью. Для исследования их антимикобактериальной активности создавали модель туберкулезной гранулемы, формирующейся in vitro из мононуклеаров периферической крови человека при культивировании и взаимодействии с вирулентными микобактериями человека штамма H37Rv в течение 12- 14 дней.  
В ходе исследований были разработаны методы более эффективной продукции литических микобактериофагов при культивировании нетуберкулезных микобактерий M. smegmatis; отработаны условия очищения микобактериофагов с помощью ионно-обменной хроматографии и получения стерильных препаратов липосом на основе экструзии через соответствующие фильтры; созданы липосомы размером 0,45 и 0,8 микрон с включенными литическими микобактериофагами. Проведен анализ включения микобактериофагов в липосомы на основе количественного определения ДНК микобактериофага при использовании ПЦР, а также проведен анализ липосомальных препаратов   с включенным микобактериофагом с помощью электронной микроскопии. Начаты исследования по изучению антимикобактериальной активности липосомальных препаратов литического микобактериофага D 29 на модели туберкулезных гранулем in vitro. Полученный препарат литического микобактериофага, заключенного в липосомы, планируется исследовать in vivo на лабораторных животных с последующей подачей заявки на регистрацию лекарственного препарата.
Результаты этих исследований были опубликованы в сборнике тезисов международной конференции Европейского респираторного общества.
Разработка принципиально нового биотерапевтического лекарственного препарата, обладающего бактерицидными (литическими) свойствами в отношении размножающихся, микобактерий туберкулеза (МБТ), в том числе устойчивых к химиотерапевтическим противотуберкулезным препаратам. Транспорт литического микобактериофага в липосомальной форме в зоны туберкулезного воспаления, обеспечивает, в том числе, бактерицидный эффект на внутриклеточную популяцию микобактерий.  В связи с быстрым литическим эффектом микобактериофагов в отношении МБТ, как чувствительных, так и лекарственно устойчивых популяций применение такого препарата приведет к повышению эффективности химиотерапии, сокращению сроков лечения туберкулеза и преодолению лекарственной устойчивости возбудителя туберкулеза.
Предполагается, что липосомальный биотерапевтический препарат микобактериофагов будет использоваться для эндобронхиального введения больным туберкулезом, что также повысит эффективность его применения, поскольку будет обеспечен избирательный транспорт препарата в бронхи, дренирующие зоны туберкулезного воспаления. Включение микобактериофагов в фосфолипидные везикулы – липосомы сможет защитить частицы микобактериофагов от протеолитических ферментов в зонах воспалительных инфильтратов и обеспечит их взаимодействие и литический (бактерицидный) эффект в отношении МБТ. 
Предполагается, что после получения результатов об эффективности биотерапевтического препарат на основе липосомальной формы литических микобактериофагов в исследованиях на экспериментальных животных, а также исследований о биобезопасности этого препарата в соответствии с рекомендациями руководства Минздрава РФ по доклиническим исследованиях бактериофагов будет получено его разрешение на опытное клиническое применение для лечения туберкулеза при эндобронхиальном введении  разрабатываемого препарата.
Михаил
Владимирский
Александрович
заведующий лаборатории иммунопатологии и иммунодиагностики туберкулезной инфекции
Доктор медицинских наук
Профессор
S-2064-2019
6602993641
180837
https://publons.com/researcher/2991357/mikhail-vladimirsky/
0000-0002-2724-5791
РОССИЯ
Ирина
Васильева
Анатольевна
директор
РОССИЯ
62.13.55
Биотехнологическое получение биолипидов
76.29.53
Туберкулез
76.03.43
Медицинская микробиология
03.03.NN
INFECTIOUS DISEASES
Михаил
Владимирский
Александрович
Основная часть
РОССИЯ
Марина
Лапенкова
Борисовна
Подбор материала
РОССИЯ
МИНЗДРАВ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1127746460896
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГБУ "НМИЦ ФПИ" Минздрава России
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр фтизиопульмонологии и инфекционных заболеваний" Министерства здравоохранения Российской Федерации
1026605629412
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения