Способ получения экзосом табака обыкновенного
молекулярная биотехнология биомедицина технологии биоинженерии клеточные технологии экзосомальные везикулы экзосомы табак обыкновенный ультрацентрифугирование биомасса каллусной культуры фосфатный буфер
Изобретение относится к биотехнологии и позволяет получать экзосомальные везикулы (экзосомы) растений, в частности табака обыкновенного, которые могут быть использованы в медицинской и косметической промышленности.
Способ получения экзосом табака обыкновенного  включает подготовку исходного материала,  его гомогенизацию и  последовательное центрифугирование в два этапа.  Далее осуществляют  отбор жидкой фазы и ее ультрацентрифугирование, суспендирование полученного осадка растительных экзосом в буфере и повторное ультрацентрифугирование .      В качестве исходного материала используют биомассу каллусной культуры клеток табака обыкновенного, которую гомогенизируют с фосфатным буфером при их соотношении 1 г : 5  мл – 1 г : 15 мл;  полученную гомогенизированную смесь центрифугируют в течение 19-21 минут при 9 000-11 000 g, далее повторно центрифугируют супернатант в течение 19-21 минут при 19 000-21 000 g.     Жидкую фазу пропускают через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм и ультрацентрифугируют ее в течение 59-61 минут при 90 000-110 000 g;     полученный осадок экзосом табака обыкновенного суспендируют в фосфатном буфере, причем на 1 г биомассы каллусной культуры клеток табака обыкновенного берут 0,9-1,1 мл фосфатного буфера, и повторно ультрацентрифугируют в течение 59-61 минут при 90 000-110 000 g.  
Технический результат выражается в следующем:
1.	расширение ассортимента используемого исходного материала, обладающего более стандартизированными свойствами, за счет:
	использования независимого от внешних факторов и самовоспроизводимого биотехнологического источника экзосом табака обыкновенного;
	культивирования в стандартных условиях, что позволяет получать большое количество экзосом, биологически равноценных выделенным из растений;
	накопления биомассы в асептических условиях, что позволяет избежать заражения каллусной культуры опасными для человека патогенами или их производными;
2.	обеспечение возможности получения экзосом табака обыкновенного:
	со средним размером 100-300 нм;
	с более узким диапазоном значений поверхностного заряда (дзета-потенциала), что способствует повышению однородности;
	с выходом не менее 1,4 мг на 1 г использованной сырой биомассы клеток.
возможно применение в медицинской и косметической промышленности
Юрий
Шкрыль
Николаевич
Научный сотрудник
Кандидат биологических наук
Доцент
D-1062-2014
6506546357
133309
0000-0002-3657-6058
РОССИЯ
Светлана
Гончарова
Николаевна
Директор Департамента сопровождения научной деятельности
РОССИЯ
62.09.39
Микроорганизмы-продуценты для биотехнологического производства
62.33.29
Культивирование растительных клеток и тканей
62.37.29
Генетическая инженерия растений
01.06.CQ
BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
Юрий
Шкрыль
Николаевич
РОССИЯ
Юлия
Югай
Анатольевна
РОССИЯ
Ольга
Грищенко
Вадимовна
РОССИЯ
Оксана
Сон
Михайловна
РОССИЯ
Людмила
Текутьева
Александровна
РОССИЯ
Жаргалма
Цыденешиева
Лудуповгна
РОССИЯ
Татьяна
Русапетова
Викторовна
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "ДАЛЬНЕВОСТОЧНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ"
1022501297785
БОРИС
КОРОБЕЦ
НИКОЛАЕВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные автономные учреждения