Способ опосредованного определения полноты инактивации антигена вируса ящура в сырье для вакцины с применением обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени при амплификации большеразмерного фрагмента
вирус вакцина антиген ящур обратно-транскриптазная полимеразная цепная реакция
Изобретение относится к области биотехнологии, средствам молекулярной диагностики и производству противоящурных вакцин, а именно к способу опосредованного определения полноты инактивации антигена вируса ящура в сырье для вакцины с применением обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ) при амплификации большеразмерного фрагмента. Исследование полноты инактивации антигена вируса ящура в сырье для инактивированных противоящурных вакцин определяют при проведении элюирования вирусной РНК, оценки степени чистоты и концентрации РНК с помощью спектрального сканирования и формулы CРНК = 40,5 × OD260 – 0,7037, обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, с помощью которой выявляют неповрежденный участок генома вируса ящура размером 7279 н.о. в диапазоне от 5′-NTR до 3D-гена включительно (наличие экспоненты) и, тем самым, определяют наличие вирулентного вируса ящура, либо выявляют отсутствие ампликона нужного размера (отсутствие экспоненты) и, тем самым, доказывать отсутствие вирулентного вируса ящура в сырье для изготовления противоящурных инактивированных вакцин.
Использование при производстве противоящурных вакцин. Разработанный способ является экономичным, позволяет одновременно исследовать несколько десятков проб, а время проведения анализа сократить до 9-10 часов, характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности (99,44%), специфичности (100%) и общей точности (99,72%).
Илья
Чвала
Александрович
зам. директора
Кандидат ветеринарных наук
Отсутствует
-
57204228517
705819
-
РОССИЯ
Петр
Косырев
Иванович
директор
РОССИЯ
68.41.53
Инфекционные болезни животных. Эпизоотология
04.03.ZC
VETERINARY SCIENCES
Максим
Доронин
Игоревич
25%
РОССИЯ
Дмитрий
Михалишин
Валерьевич
25%
РОССИЯ
Алексей
Борисов
Валерьевич
25%
РОССИЯ
Антон
Козлов
Александрович
25%
РОССИЯ
ФГБУ "ВНИИЗЖ"
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ОХРАНЫ ЗДОРОВЬЯ ЖИВОТНЫХ"
1023301283720
Организация
Федеральная служба по ветеринарному и фитосанитарному надзору
Федеральные государственные бюджетные учреждения
ФГБУ "ВНИИЗЖ"
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ОХРАНЫ ЗДОРОВЬЯ ЖИВОТНЫХ"
1023301283720
Организация
Федеральная служба по ветеринарному и фитосанитарному надзору
Федеральные государственные бюджетные учреждения