Самособирающиеся белковые комплексы на основе химерных белков ApofRBD и ApofS1RBD, полученных слиянием апоферритина с рецептор-связывающим доменом и частью S1 домена S-белка SARS-CoV-2
ферритин SARS-CoV-2 S-белок химерный белок наночастица
Разработан способ получения химерных белков ApofRBD и ApofS1RBD и сборки белковых комплексов 8×ApofRBD и 24×ApofS1RBD на их основе, состоящий в клонировании составляющих фрагментов гена апоферритина и S-белка вируса и культивировании рекомбинантного штамма-продуцента E. coli на богатой питательной среде, содержащей триптон, дрожжевой экстракт, глицерин и глюкозу в фосфатном буфере, с индукцией биосинтеза L-рамнозой, с последующим выделением белков методом никельафинной хроматографией, отличающийся применением ингибиторов протеаз cOmplete и 0,05% Triton-X100 при разрушении клеток, двойной никельафинной хроматографией с добавлением SUMO-протеазы, и самосборкой целевых белковых комплексов в физрастворе с 25 мМ Tris*HCl pH 7,4 при 24⁰С.
Способ контроля самосборки белковых комплексов октамера 8×ApofRBD и икоситетрамера 24×ApofS1RBD осуществляется методами малоуглового рентгеновского рассеяния и электронной микроскопии (ЭМ) с использованием негативного контрастирования.
Изобретение относится к фармакологии и биотехнологии и может быть использовано в медико-биологической промышленности и медицине
Иван
Гущин
Юрьевич
заведующий лабораторией
Кандидат физико-математических наук
Доцент
AAO-8829-2020
40561259100
https://mipt.ru/science/labs/membrane_systems/
0000-0002-5348-6070
РОССИЯ
Виталий
Баган
Анатольевич
Проректор по научной работе
РОССИЯ
34.25.29
Биология вирусов человека, животных, растений и бактерий
34.25.37
Вирусные препараты
34.15.15
Пространственная структура и свойства биополимеров
34.17.53
Прикладная биофизика
34.17.15
Молекулярная биофизика
01.06.DA
BIOPHYSICS
Сергей
Баженов
Владимирович
Участвовал в разработке генноинженерных конструкций, разработал схему сборки генетических конструкций, участвовал в разработке протоколов по экспрессии целевых белков
РОССИЯ
Александр
Куклин
Иванович
Является одним из авторов технического решения, Участвовал в экспериментах методом малоуглового рассеяния, в обработке и анализе данных
РОССИЯ
Илья
Манухов
Владимирович
Участвовал в разработке генноинженерных конструкций и протоколов по экспрессии целевых белков
РОССИЯ
Всеволод
Сударев
Владимирович
Проводил сборку генноинженерных конструкций, экспрессию, выделение и очистку целевых белков, проводил эксперименты методом малоуглового рассеяния и электронной микроскопии, участвовал в обработке и анализе данных
РОССИЯ
Алексей
Власов
Валерьевич
Является одним из авторов технического решения, разработал протоколы экспрессии, выделения и очистки целевых белков, проводил эксперименты методом малоуглового рассеяния, участвовал в обработке и анализе данных
РОССИЯ
Анастасия
Власова
Дмитриевна
Является одним из авторов технического решения, участвовала в разработке идеи генноинженерных конструкций
РОССИЯ
Юрий
Рижиков
Леонидович
Проводил эксперименты методом малоуглового рассеяния и электронной микроскопии, обрабатывал и анализировал экпериментальные данные
БЕЛАРУСЬ
Николай
Бондарев
Антонович
5%, проводил эксперименты по экспрессии и очистке целевых белков
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
МФТИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "МОСКОВСКИЙ ФИЗИКО-ТЕХНИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ (НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ)"
1027739386135
НИКОЛАЙ
КУДРЯВЦЕВ
НИКОЛАЕВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные автономные учреждения