Рекомбинантная плазмида, способ её конструирования и штамм дрожжей Komagataella pastoris - продуцент иммунного интерферона-гамма собаки
Гетерологичный синтез гамма-интерферон собаки дрожжи Komagataella pastoris
Изобретение относится к биотехнологии, к генной инженерии, микробиологической промышленности и ветеринарии и представляет собой дрожжевой штамм - продуцент секреторного рекомбинантного иммунного интерферона гамма собаки, содержащий сконструированную in vitro плазмиду, которая обеспечивает синтез секреторного рекомбинантного иммунного интерферона гамма собаки. Из плазмиды pPICZαA с помощью гидролиза рестриктазами XhoI и XbaI удаляют область сайта множественного клонирования размером 25 п.о. и далее лигируют по данным сайтам рестрикции последовательность рекомбинантного гена гамма-интерферона собаки. Рекомбинантный ген включает фрагмент открытой рамки считывания гена гамма-интерферона, оптимизированного для экспрессии в дрожжах Komagataella pastoris. Проводят очистку итогового рекомбинантного белка методом аффинной хроматографии, затем лигазной смесью трансформируют клетки бактерий Escherichia coli и отбирают клоны, содержащие рекомбинантную плазмидную ДНК pIFN-Gcf. Изобретение позволяет создать штамм дрожжей Komagataella pastoris, который может быть использован для получения ветеринарного препарата на основе интерферона гамма собаки (Canis familiaris) для профилактики и лечения инфекционных вирусных заболеваний домашних животных, таких как чума собак, парвовирус собак, вирус парагриппа собак, инфекционный гепатит собак.
Данная разработка открывает путь к получению широкого класса фармакологических белков для нужд ветеринарии, и потенциально медицины, благодаря уникальной платформе, на которой она получена. Так, целевые продукты имеют низкую себестоимость по причине высокой продуктивности дрожжевых продуцентов и использованию дешевых питательных сред для культивирования. Важнейшим преимуществом в данном случае также выступает сниженная вероятность опасных побочных реакций со стороны иммунной системы животных.
Елена
Самбук
Викторовна
профессор кафедры генетики и биотехнологии СПбГУ
Доктор биологических наук
Доцент
H-6895–2013
6603061322
84887
0000-0003-0837-0498
РОССИЯ
Елена
Лебедева
Витальевна
Начальник Управления научных исследований
РОССИЯ
34.15.23
Молекулярная генетика
34.15.27
Генетическая инженерия
62.37.35
Вакцины, полученные методом генетической инженерии
68.41.53
Инфекционные болезни животных. Эпизоотология
01.06.CQ
BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
04.03.ZC
VETERINARY SCIENCES
Марина
Падкина
Владимировна
РОССИЯ
Дмитрий
Музаев
Михайлович
РОССИЯ
РФФИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "РОССИЙСКИЙ ФОНД ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ"
1037739411489
Организация
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский фонд фундаментальных исследований"
Федеральные государственные бюджетные учреждения
Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербургский университет, СПбГУ
федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный университет"
1037800006089
Организация
Правительство Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения