СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИРУСОЦИДНОГО ДЕЙСТВИЯ СРЕДСТВ И СПОСОБОВ БОРЬБЫ С ВИРУСОМ МЕШОТЧАТОГО РАСПЛОДА ПЧЕЛ
пчелы расплод мешотчатый способ
Способ определения вирусоцидного действия средств борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел включает добавление препарата к вируссодержащей суспензии, добавление полученной смеси в культуру клеток, культивирование вируса в термостате, микроскопию исследуемых культур клеток и контроль результатов. При этом вируссодержащий материал in vitro смешивают с испытуемым препаратом в концентрациях, определенных дозировкой исследуемого препарата и выдерживают испытуемую смесь в холодильнике при t=+4°C в течение 2 суток. Смесь доводят до t=+15-25°C и фильтруют через миллипоровый фильтр с диаметром пор 45 нанометров. После чего монослой культуры клеток почки теленка отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и проводят ее заражение в течение 2 часов при t=+34±1°C. Затем смесь удаляют с монослоя, клетки отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и в культуры вносят поддерживающую питательную среду ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1. В контрольных флаконах ростовую среду заменяли на поддерживающую, вторым контролем являлась культура клеток, зараженная вирусом. Все культуры инкубируют при t=+34±1°C до 4-7 суток, ежедневно просматривая с целью выявления цитопатогенного действия. Через 4 суток культуры клеток окрашивают азур-эозином по Романовскому-Гимза, выявляют признаки воздействия вируса мешотчатого расплода пчел на клетки почки теленка - разрушение целостности монослоя, появление вакуолей, пикноз ядер. При наличии этих признаков вирус присутствует в испытуемой смеси и препарат не подействовал на вирус мешотчатого расплода пчел, а отсутствие данных признаков подтверждает гибель вируса. Изобретение обеспечивает создание способа диагностики, основанной на признаках проявления вируса в клетках, с более точными качественными показателями изменений.
Изобретение относится к области ветеринарии и пчеловодства, в частности к выявлению средств, обладающих вирусоцидным действием на вирус мешотчатого расплода пчел, и может использоваться в научно-исследовательских лабораториях, а также в производственных ветеринарных лабораториях.
Михаил
Гулюкин
Иванович
Руководитель научного направления
Доктор ветеринарных наук
Академик
V-4640-2017
56114366900
112679
0000-0002-7489-6175
РОССИЯ
Алексей
Гулюкин
Михайлович
Директор
РОССИЯ
68.41.05
Методы исследований в ветеринарии
04.03.ZC
VETERINARY SCIENCES
Татьяна
Гальнбек
Валерьевна
Постановка опытов, поиск и анализ научной литературы, творческая изобретательская деятельность.
РОССИЯ
Анатолий
Сотников
Николаевич
Постановка опытов, поиск и анализ научной литературы, творческая изобретательская деятельность.
РОССИЯ
Алексей
Гулюкин
Михайлович
Постановка опытов, поиск и анализ научной литературы, творческая изобретательская деятельность.
РОССИЯ
Ирина
Потапова
Валерьевна
Постановка опытов, поиск и анализ научной литературы, творческая изобретательская деятельность.
РОССИЯ
Андрей
Калинин
Геннадьевич
Постановка опытов, поиск и анализ научной литературы, творческая изобретательская деятельность.
РОССИЯ
Михаил
Гулюкин
Иванович
Постановка опытов, поиск и анализ научной литературы, творческая изобретательская деятельность.
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "ФЕДЕРАЛЬНЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР - ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ ИМЕНИ К.И. СКРЯБИНА И Я.Р. КОВАЛЕНКО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК"
1037700258870
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения