СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИРУСОЦИДНОГО ДЕЙСТВИЯ СРЕДСТВ И СПОСОБОВ БОРЬБЫ С ВИРУСОМ МЕШОТЧАТОГО РАСПЛОДА ПЧЕЛ
способ мешотчатый расплод пчелы
Способ определения вирусоцидного действия средств борьбы с вирусом мешотчатого расплода пчел включает добавление препарата к вируссодержащей суспензии, добавление полученной смеси в культуру клеток, культивирование вируса в термостате, микроскопию исследуемых культур клеток и контроль результатов. При этом вируссодержащий материал in vitro смешивают с испытуемым препаратом в концентрациях, определенных дозировкой исследуемого препарата и выдерживают испытуемую смесь в холодильнике при t=+4°C в течение 2 суток. Смесь доводят до t=+15-25°C и фильтруют через миллипоровый фильтр с диаметром пор 45 нанометров. После чего монослой культуры клеток почки теленка отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и проводят ее заражение в течение 2 часов при t=+34±1°C. Затем смесь удаляют с монослоя, клетки отмывают поддерживающей питательной средой ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1 и в культуры вносят поддерживающую питательную среду ИГЛА МЕМ + Гидролизат лактальбумина 0,5% в соотношении 1:1. В контрольных флаконах ростовую среду заменяли на поддерживающую, вторым контролем являлась культура клеток, зараженная вирусом. Все культуры инкубируют при t=+34±1°C до 4-7 суток, ежедневно просматривая с целью выявления цитопатогенного действия. Через 4 суток культуры клеток окрашивают азур-эозином по Романовскому-Гимза, выявляют признаки воздействия вируса мешотчатого расплода пчел на клетки почки теленка - разрушение целостности монослоя, появление вакуолей, пикноз ядер. При наличии этих признаков вирус присутствует в испытуемой смеси и препарат не подействовал на вирус мешотчатого расплода пчел, а отсутствие данных признаков подтверждает гибель вируса. Изобретение обеспечивает создание способа диагностики, основанной на признаках проявления вируса в клетках, с более точными качественными показателями изменений.
Изобретение относится к области ветеринарии и пчеловодства, в частности к выявлению средств, обладающих вирусоцидным действием на вирус мешотчатого расплода пчел, и может использоваться в научно-исследовательских лабораториях, а также в производственных ветеринарных лабораториях.
Андрей
Капустин
Владимирович
Зам. Директора
Доктор биологических наук
Доцент
E-1530-2018
-
337377
0000-0001-8725-2320
РОССИЯ
Алексей
Гулюкин
Михайлович
Директор
РОССИЯ
68.41.05
Методы исследований в ветеринарии
01.06.CU
BIOLOGY
Татьяна
Гальнбек
Валерьевна
РОССИЯ
Анатолий
Сотников
Николаевич
РОССИЯ
Михаил
Гулюкин
Иванович
РОССИЯ
Алексей
Гулюкин
Михайлович
РОССИЯ
Ирина
Потапова
Валерьевна
РОССИЯ
Андрей
Калинин
Геннадьевич
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "ФЕДЕРАЛЬНЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР - ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ ИМЕНИ К.И. СКРЯБИНА И Я.Р. КОВАЛЕНКО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК"
1037700258870
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения