Способ получения суспензии эндотелиальных клеток роговицы человека с помощью фермента
суспензия эндотелиальные клетки роговица человека фермент
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. С поверхности кадаверного глаза человека полностью удаляют эпителий роговицы и из него в стерильных условиях при помощи трепана формируют корнеосклеральный диск (КСД), его кладут на стерильную поверхность эндотелием вверх, далее производят отсепаровку краев Десцеметовой мембраны (ДМ) от переднего кольца Швальбе на протяжении 180 градусов. Пинцетом отслаивают ДМ к центру на половину ее площади, складывая задним эпителием друг к другу. Трепанационным лезвием производят разрез со стороны задней стромы роговицы, отделяют пинцетом ДМ с эндотелием и переносят их в пробирку Эппендорф, добавляют 0,3 мл рекомбинантного фермента TrypLE, затем помещают в термошейкер в течение 5 мин, 300 об/мин при 37 градусах Цельсия. Далее проводят инактивацию содержимого пробирки 10-кратным разбавлением при помощи раствора для хранения роговицы с последующим центрифугированием в течение 5 мин, 900 об/мин при 37 градусах Цельсия. Способ позволяет получить суспензию эндотелиальных клеток из кадаверного глазного яблока человека, что является доступной и легко воспроизводимой процедурой при наличии стандартного лабораторного оборудования, что упрощает возможности ее применения.
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, может найти применение в клинической практике для замещения дефектов эндотелиального слоя роговицы.
76.29.56
Офтальмология
Ольга
Антонова
Павловна
"Кандидат медицинских наук"
"Младший научный сотрудник"
"ААВ-2273-2022"
"57200244869"
"261199"
"-"
РОССИЯ
Дмитрий
Островский
Сергеевич
"Кандидат биологических наук"
"Отсутствует"
"-"
"57194010407"
"921411"
"-"
РОССИЯ
Сергей
Борзенок
Анатольевич
"Доктор медицинских наук"
"Профессор"
РОССИЯ
Борис
Малюгин
Эдуардович
"Доктор медицинских наук"
"Профессор"
"K-2631-2016"
"25927302300"
"580552"
РОССИЯ
МИНЗДРАВ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1127746460896
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГАУ "НМИЦ "МНТК "МИКРОХИРУРГИЯ ГЛАЗА" ИМ. АКАД. С.Н. ФЕДОРОВА" МИНЗДРАВА РОССИИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "НАЦИОНАЛЬНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ЦЕНТР "МЕЖОТРАСЛЕВОЙ НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКИЙ КОМПЛЕКС "МИКРОХИРУРГИЯ ГЛАЗА" ИМЕНИ АКАДЕМИКА С.Н. ФЕДОРОВА" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1027739714606
АЛЕКСАНДР
ЧУХРАЁВ
МИХАЙЛОВИЧ
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные автономные учреждения