Последовательность ДНК, кодирующая рекомбинантную CRISPR-ассоциированную эндонуклеазу II-типа бактерий рода Bradyrhizobium, плазмидный вектор pGDCas9Br и способ его получения
рекомбинантная ДНК CRISPR Cas Bradyrhizobium плазмида
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии. Сущность изобретения: разработан способ конструирования синтетической ДНК, характеризующейся последовательностью нуклеотидов, приведённой в патенте, в виде SEQ ID NO:2, включающей гибридный ген, кодирующий оптимизированную рекомбинантную CRISPR-ассоциированную эндонуклеазу II-типа бактерий рода Bradyrhizobium, объединенную с сигналом ядерного транспорта NLSSV40 (на N-конце кодируемого белка) и нуклеоплазминовым NLS (на С-конце кодируемого белкового продукта), а также дополнительными сайтами узнавания для эндонуклеаз рестрикции. Для возможности трансформации бактериальных штаммов-продуцентов экзогенной рекомбинантной CRISPR-ассоциированной эндонуклеазой II-типа бактерий рода Bradyrhizobium  создан оригинальный плазмидный вектор pGDCas9Br, содержащий в своём составе предложенный гибридный ген, регулируемый сильным промотором фага Т5 и характеризующийся последовательностью нуклеотидов, приведённой в приложении патента, в виде SEQ ID NO:3.
Изобретение применимо в научных и практических исследованиях для различных задач генной или белковой инженерии. В частности в качестве необходимой основы для конструирования новых систем для генного и геномного редактирования.
Константин
Ярыгин
Никитич
Зав.лаб., г.н.с.
Доктор биологических наук
Член-корреспондент РАН
C-4047-2009
6602892497
7567-1230
0000-0002-2261-851X
РОССИЯ
Елена
Пономаренко
Александровна
Директор
РОССИЯ
34.27.01
Общие вопросы
62.37.99
Другие проблемы генетической инженерии
34.15.27
Генетическая инженерия
01.06.GU
ECOLOGY
01.06.CQ
BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
01.06.CU
BIOLOGY
Дмитрий
Гришин
Викторович
Идея, координирование работ, биоинформатическое планирование
РОССИЯ
Роман
Куркин
Владимирович
Сборка фрагментов ДНК методом Гибсона
РОССИЯ
Ольга
Парфенова
Константиновна
Планирование праймеров и проведение амплификации. Подготовка компетентных клеток E.coli
РОССИЯ
Екатерина
Касап
Юрьевна
Проведение трансформации бактериальных клеток E.coli, проведение посевов и пересевов трансформантов
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ИБМХ
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича"
1027739053792
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения