Модифицированные генетические конструкции для экспрессии N-концевого домена белка CTCF/ N-концевого домена и двух ближайших к нему доменов типа «цинковый палец» белка CTCF / N-концевого домена и семи ближайших к нему доменов типа «цинковый палец» белка CTCF слитых с белками dCas9 и EGFP
геном котрансфекция белок GFP "цинковый палец" белок Cas9 модифицированные генетические конструкции Химерный белок хроматиновые петли
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению химерных белков, состоящих из N-концевого домена белка CTCF слитых с белками dCas9 и GFP; N-концевого домена и двух ближайших к нему доменов типа «цинковый палец» белка CTCF слитых с белками dCas9 и GFP; N-концевого домена и семи ближайших к нему доменов типа «цинковый палец» белка CTCF слитых с белками dCas9 и GFP. Данные химерные белки могут быть использованы для модификации топологии геномных локусов и образования хроматиновых петель. Предложенные генетические конструкции имеют оптимизированные нуклеотидные последовательности, кодирующие части нативного человеческого архитектурного белка CTCF, но при этом минимизирующие сторонние эффекты С-концевого домена данного белка. Котрансфекция данных генетических конструкций вместе с gRNA в эукариотическую систему позволяет влиять на регуляторные контакты любого локуса генома.
Создание линии трансгенных мутантных мышей с постоянной экспрессией данных химерных белков и gRNA к промотору белка, на экспрессию которого мы хотим повлиять; Электропорация данных плазмид и плазмид-носителей gRNA к онкосупрессору и близкому энхансеру в твердые опухоли с целью создания контакта между ними, начала экспрессии онкосупрессора и замедления развития рака; Лентивирусная трансдукция предусмотренная строением векторной плазмиды в различные культуральные клеточные линии с плазмидой-носителем gRNA для различных фундаментальных эпигенетических исследований профилей контактов целевых локусов.
34.15.25
Молекулярная биология гена
34.15.27
Генетическая инженерия
Сергей
Ульянов
Владимирович
"Кандидат биологических наук"
"Отсутствует"
"A-4980-2014"
"54586135200"
"724044"
"http://istina.msu.ru/profile/SergeyUlyanov/"
"0000-0002-6187-310X"
РОССИЯ
Евгения
Тюкачева
Александровна
"Отсутствует"
"Отсутствует"
""
""
""
РОССИЯ
Сергей
Разин
Владимирович
"Доктор биологических наук"
"Член-корреспондент РАН"
"M-6701-2015"
"24374782900"
"https://istina.msu.ru/profile/sergey.v.razin/"
"0000-0003-1976-8861"
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ М.В.ЛОМОНОСОВА, МГУ ИМЕНИ М.В.ЛОМОНОСОВА, МОСКОВСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИЛИ МГУ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ М.В.ЛОМОНОСОВА"
1037700258694
ВИКТОР
САДОВНИЧИЙ
АНТОНОВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения