Способ выделения экзосом из плазмы крови
ОНКОЛОГИЯ, ЭКЗОСОМЫ, ЦИРКУЛИРУЮЩИЕ МИКРОРНК, ПЛАЗМА КРОВИ, ПЛАЗМЕННЫЕ БЕЛКИ, ЛИПОПРОТЕИНЫ, СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ, ЭКЗОСОМАЛЬНАЯ ФРАКЦИЯ, ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕ, ДЕКСТРАН, ПОЛИЭТИЛЕНГЛИКОЛЬ
Изобретение относится к области биотехнологиии и диагностической медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано для выделения экзосом из плазмы крови. С этой целью к плазме крови, полученной путем центрифугирования из периферической крови, добавляют полимеры декстран и полиэтиленгликоль; смесь инкубируют в течение 1 часа при температуре +4°С и центрифугируют при ускорении 1000 G, +4°С в течение 10 минут, полученный осадок растворяют в полимерной смеси декстрана и полиэтиленгликоля в фосфатно-солевом буфере, повторно центрифугируют в том же режиме до получения целевого продукта. Целесообразно полученный целевой продукт лизировать для выделения экзосомальной микроРНК с последующим ОТ-ПЦР анализом. Способ позволяет выделить непосредственно из плазмы крови максимальное количество экзосом при минимальной контаминации препарата плазменными белками и липопротеинами, прост в реализации и имеет низкую стоимость.
Результат интеллектуальной деятельности может быть использован для диагностики или мониторинга онкологических заболеваний. Реализация способа повышает эффективность последующего анализа экзосомальной фракции циркулирующих молекул микроРНК.
Малек А.В.
Заведующий научной лабораторией
Кандидат медицинских наук
Беляев А.М.
Директор
34.15.51
Молекулярная онкология
76.29.49
Онкология
03.01.QA
MEDICINE, RESEARCH & EXPERIMENTAL
03.02.DM
ONCOLOGY
Елена
Сидина
Игоревна
Выделение везикул из культуральных сред.
Надежда
Никифорова
Станиславовна
Выделение везикул из биологических жидкостей.
Анастасия
Малек
Валерьевна
Автор идеи, анализ аналогов, подбор условий оптимизации, анализ результатов работы, оформление изобретения.
Инга
Назарова
Валерьевна
Качественная и количественная оценка везикул перед использованием в процессе разработки метода.
Лидия
Забегина
Михайловна
Выделение везикулярной РНК, ОТ-ПЦР анализ миркоРНК.
Маргарита
Князева
Сергеевна
Создание и валидация систем для анализа миркоРНК.
Мария
Слюсаренко
Александровна
Анализ литературы, планирование и проведение экспериментов, оптимизация условий.
Наиля
Назмиева
Альфредовна
Выделение везикулярной РНК, ОТ-ПЦР анализ миркоРНК.
МИНЗДРАВ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1127746460896
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова" Минздрава России
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Петрова" Министерства здравоохранения Российской Федерации
1027812406687
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения