СПОСОБ И ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ДЕТЕКЦИИ МУТАЦИИ C.1934DUPG В ГЕНЕ ASXL1 ПРИ ГЕМОБЛАСТОЗАХ
Биотехнологии Генетика Гематология
Данное изобретение относится к медицине (биотехнологиям), а именно к способу для осуществления детекции мутации c.1934dupG в гене ASXL1 при гемобластозах. Техническим результатом настоящего изобретения является ускорение процесса определения мутации, поскольку, в сравнении с уже известными методами, требует меньшего количества этапов исследования. В том числе биоматериал (исследуемая ДНК) дополнительно не очищается после выделения из венозной крови и в связи с иным характером проведения исследования – ДНК вводится в меньшем объеме (5 нг/мкл).  Также изобретение повышает точность исследования мутации c.1934dupG в гене ASXL1 благодаря использованию двух линий контроля для сравнения собранных образцов ДНК – в контрольных лунках дополнительно находится контрольная ДНК и ДНК с 3% мутантной матрицей соответственно маркировке контрольных лунок для исследования ASXL1. В отличие от других способов исследований, для данного способа происходит забор венозной крови вместо костного мозга, что делает процесс проще для медицинского персонала и менее болезненным для пациента. Заявляемая тест-система для выполнения анализов исследования мутации c.1934dupG в гене ASXL1 состоит из поликарбонатного планшета для ПЦР и содержащая в лунках смесь для реакции под слоем парафина, где в контрольных лунках содержится отрицательный и положительный образцы для внутреннего контроля исследования, при этом смесь для реакции имеет в составе деионизированную воду, свободную от ДНК, буферный раствор, нуклеотиды, хлорид магния, ДНК-полимераза, праймеры для отжига на матрице ДНК пациента в каждой лунке планшета. Заявляемый способ выполнения анализов исследования мутации c.1934dupG в гене ASXL1 с использованием тест-системы по п. 1 содержит этапы, на которых: 
а)	осуществляют забор венозной периферической крови в вакуумные пробирки у пациента; 
б)	проводят процедуру выделения генетического материала с использованием наборов для выделения ДНК из периферической крови;
в)	генетический материал (ДНК пациента) помещают в тест-систему по п. 1;
г)	закрывают планшет оптически прозрачной пленкой для запечатывания ПЦР-планшетов и устанавливают планшет в 96-луночный амплификатор для ПЦР в реальном времени; 
д)	в амплификаторе устанавливают программу для амплификации и выбирают канал FAM для детекции флуоресценции;
е)	по окончанию программы анализируют эффективность амплификации нормальной и мутантной матрицы у каждого из пациентов путем расчёта показателя эффективности амплификации, сопоставляя его с усредненным значением эффективности амплификации для контролей, полученных в эксперименте, который предполагает настройку лабораторного оборудования при использовании контрольных линий тест-системы.
Изобретение может быть использовано в прогнозе клинического течения миелоидных новообразований.
Павел
Липилкин
Викторович
-
Отсутствует
Отсутствует
-
57224918835
-
https://vk.com/lipilkin
0000-0002-3220-2753
РОССИЯ
Павел
Липилкин
Викторович
-
РОССИЯ
62.61.61
Биомаркеры для диагностики. Мишени лекарственных средств
03.02.MA
HEMATOLOGY
Павел
Липилкин
Викторович
Подготовка формулы изобретения, патентный поиск
РОССИЯ
Елизавета
Кулаева
Дмитриевна
Подготовка реферата, описания изобретения
РОССИЯ
ФОНД СОДЕЙСТВИЯ ИННОВАЦИЯМ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ "ФОНД СОДЕЙСТВИЯ РАЗВИТИЮ МАЛЫХ ФОРМ ПРЕДПРИЯТИЙ В НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ СФЕРЕ"
1027739479734
СЕРГЕЙ
ПОЛЯКОВ
ГЕННАДЬЕВИЧ
Организация
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Фонд содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере"
Федеральные государственные бюджетные учреждения
Павел
Липилкин
Викторович
Физическое лицо
РОССИЯ