Получение гена фосфолипазы А2 с измененным оптимумом pH путем удаления сайтов гликозилирования
ФОСФОЛИПАЗА А2, PICHIA PASTORIS, МЕТИЛОТРОФНЫЕ ДРОЖЖИ
Предложена рекомбинантная плазмида pPICZαA-PLA2-K4, содержащая синтетический ген фосфолипазы А2 (SEQ ID NO: 1), состоящего из измененной последовательности фосфолипазы А2, оптимизированной для экспрессии гена в Pichia pastoris, штамм X-33/pPICZαA-PLA2-K4, полученный путем трансформации дрожжей Pichia pastoris X-33 линеаризованной плазмидой pPICZαA-PLA2-K4. Изобретение обеспечивает получение активной рекомбинантной фосфолипазы А2 Streptomyces violaceoruber, секретируемой в культуральную среду с высоким выходом. Плазмида pPICZαA-PLA2-K4, обеспечивающая биосинтез и секрецию дегликозилированной фосфолипазы А2 Streptomyces violaceoruber c pH оптимумом 6,5, содержит ген дегликозилированной фосфолипазы А2 SEQ ID NO: 1. Изобретение позволяет изменить pH-оптимума секретируемого фермента фосфолипаза А2 с 6,0 до 6,5. Гликозилирование позволяет достичь максимальной гомогенности фермента на стадии очистки.
Изобретение относится к генной инженерии и биотехнологии и может быть использовано для получения фосфолипазы А2. Фосфолипазы А2 активно применяются в различных отраслях биотехнологической и пищевой промышленности, в частности для ферментативного дегуммирования растительных масел, обработки яичного желтка и получения эммульгаторов.  Создание новых штамм-продуцентов фосфолипазы А2 с измененным pH оптимумом на основе разработанных генетических конструктов позволяет расширить спектр ферментов для биотехнологической индустрии.
Попов В. О.
Научный руководитель ФИЦ Биотехнологии РАН
Доктор химических наук
Садыхов Э.Г.
ВРИО директора
62.37.43
Традиционные продукты, полученные методом генетической инженерии
62.13.41
Биотехнологическое получение ферментных препаратов
02.11.JY
FOOD SCIENCE & TECHNOLOGY
04.02.AD
AGRICULTURE, DAIRY & ANIMAL SCIENCE
01.06.CQ
BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
Наталия
Чертова
Вячеславовна
Проведение технической части работы
Алексей
Липкин
Валерьевич
Анализ результатов и экономическая оценка
Сергей
Филькин
Юрьевич
Анализ научно-исследовательской и нормативной литературы по теме
Алексей
Федоров
Николаевич
Организатор и  куратор работ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФИЦ Биотехнологии РАН
Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии» Российской академии наук"
1037700131633
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения