Способ определения активности эндонуклеаз рестрикции в клеточных экстрактах микроорганизмов
клеточные экстракты микроорганизмов эндонуклеазы рестрикции ДНК-зонд
Запускают реакцию путем смешивания растворов ДНК-зонда и клеточного экстракта в соотношении 1:1 и регистрируют изменение интенсивности флуоресценции FRET-пары в интервале времени 15-3600 сек. Для этого, в 96-луночном планшете для флуориметра смешивают растворы субстрата (20 мкМ), буфера (50 мМ Tris-HCl pH 7.5, 50 мМ KCl, 1 мМ ЭДТА, 5 мМ MgCl2, 1 мМ ДТТ, 7% глицерин) и образца клеточного экстракта микроорганизма (20 мкг общего белка). В качестве ДНК-зонда используют комплементарный олигодезоксирибонуклеотид, несущий FRET-пару FAM/BHQ1 на концах цепи, а также содержащий в своем составе 6-звенную вырожденную последовательность. Технический результат: упрощение способа и повышение производительности определения активности эндонуклеаз рестрикции в клеточных экстрактах микроорганизмов.
научные исследования
Никита
Кузнецов
Александрович
Заведующий лабораторией
Доктор химических наук
Отсутствует
F-3245-2011
7201470827
12685
-
РОССИЯ
Владимир
Коваль
Васильевич
Исполняющий обязанности директора
РОССИЯ
34.15.27
Генетическая инженерия
01.06.CQ
BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
Ирина
Алексеева
Владимировна
РОССИЯ
Александра
Кузнецова
Александровна
РОССИЯ
Никита
Кузнецов
Александрович
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ИХБФМ СО РАН
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ХИМИЧЕСКОЙ БИОЛОГИИ И ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ СИБИРСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК
1025403659852
ДМИТРИЙ
ПЫШНЫЙ
ВЛАДИМИРОВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения