Способ получения генно-модифицированных мышей, экспрессирующих миниген антитромбина III человека, с помощью микроинъекций TelN-линеаризованного фрагмента ДНК
рекомбинантные плазмиды трансгенная мышь антитромбин III TelN миниген
Предложены рекомбинантная плазмидная ДНК pTelN, в которой полилинкер фланкирован сайтами протеломеразы TelN, и способ получения линейных двуцепочечных фрагментов ДНК для микроинъекций с помощью фермента TelN из фага N15. В частности, получаемые с помощью TelN линейные фрагменты ДНК имеют ковалентно замкнутые концы. На основе плазмиды pTelN получена рекомбинантная плазмида pTelN-gAT3Spl, включающая миниген антитромбина III человека (АТIII) под контролем транскрипционных элементов гена Serpinс1 мыши, сигнала полиаденилирования из вируса SV40 и терминатора транскрипции из гена SKIV2L человека, фланкированный в 5’ и 3’-областях геномными последовательностями локуса Serpinс1 мыши. С помощью микроинъекций линейного фрагмента ДНК, полученного из плазмиды pTelN-gAT3Spl предложенным в изобретении способом, созданы линии генно-модифицированных мышей, экспрессирующих миниген АТIII человека в ткани печени. Установлено, что миниген АТIII эффективно сплайсируется в клетках печени мыши и не отмечается формирования аберрантных транскриптов. Изобретение решает задачу создания модели для получения гуманизированных по гену Serpinc1 животных.
Предложенная рекомбинантная плазмида pTelN-gAT3Spl может быть использована для получения трансгенных мышей, гуманизированных по гену Serpinс1, с помощью технологии CRIPSR/Cas9.
Оксана
Максименко
Геннадьевна
руководитель центра
Кандидат биологических наук
Отсутствует
I-1582-2013
14832993500
РОССИЯ
Павел
Георгиев
Георгиевич
директор
РОССИЯ
34.15.25
Молекулярная биология гена
01.06.CQ
BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
Юлия
Силаева
Юрьевна
РОССИЯ
Михаил
Шепелев
Валентинович
РОССИЯ
Диана
Коршунова
Сергеевна
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ИБГ РАН
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии гена Российской академии наук
1027739618037
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Учреждения