Способ получения антимикробных пептидов из тромбоцитов курицы домашней
антимикробные пептиды тромбоциты курица домашняя
Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии и биохимии, и предназначено для получения антимикробных пептидов. Для получения антимикробных пептидов из тромбоцитов курицы домашней осуществляют следующие сбор свежей крови кур в пластиковые контейнеры с добавлением 3,8% раствора цитрата натрия (рН 3,5). Центрифугируют собранную кровь при 250 g в течение 30 минут. Полученный супернатант центрифугируют при 1000 g 30 минут. Полученные осажденные тромбоциты отмывают трижды средой 199 с добавлением 3,8% цитрата натрия. Отмытую тромбоцитарную массу ресуспендируют в 10%-ной уксусной кислоте и выдерживают при -15…-20°С в течение 24 часов. Размораживают и центрифугируют полученный экстракт при 1000 g в течение 40 минут. Высаживают антимикробные вещества из полученного супернатанта охлажденным ацетоном в соотношении 1:7 (объем/объем) в течение 12 часов при 4°С. Центрифугируют осадок при 6000 g в течение 10 минут, высушивают на воздухе при интенсивном перемешивании и измельчают. Обессоливают полученный ацетоновый осадок путем обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ) в ступенчатом градиенте увеличения концентрации 80% водного ацетонитрила в 0,1% водной трифторуксусной кислоте (ТФУ) до значения 75%. После элюции с колонки подупаривают суммарный экстракт от избыточного содержания ацетонитрила на вакуумной центрифуге с последующей лиофилизацией. Перерастворяют высушенный обессоленный экстракт в 0,1% ТФУ и разделяют методом аналитической ОФ-ВЭЖХ в линейном градиенте повышения концентрации водного ацетонитрила в водной ТФУ от 8 до 40% (основной) и 40-56% (дополнительный). Собирают и лиофилизируют антимикробные пептиды. Использование изобретения обеспечивает получение очищенных антимикробных пептидов из тромбоцитов курицы домашней.
микробиология, биохимия
Мария
Сычева
Викторовна
заведующий кафедрой
Доктор биологических наук
Профессор
-
-
РОССИЯ
Алексей
Гончаров
Геннадьевич
ректор
РОССИЯ
34.27.05
Методы и аппаратура в микробиологии
02.06.IG
ENGINEERING, BIOMEDICAL
Мария
Сычева
Викторовна
25 %
РОССИЯ
Евгений
Рогожин
Александрович
15 %
РОССИЯ
Юлия
Пешкова
Игоревна
15 %
РОССИЯ
Алексей
Васильченко
Сергеевич
15 %
РОССИЯ
Ольга
Карташова
Львовна
15 %
РОССИЯ
Татьяна
Пашкова
Михайловна
15 %
РОССИЯ
ФГБОУ ВО Оренбургский ГАУ
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Оренбургский государственный аграрный университет"
1025601020521
Организация
Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения
ФГБОУ ВО Оренбургский ГАУ
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Оренбургский государственный аграрный университет"
1025601020521
Организация
Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения