Модифицированная генетическая конструкция для рекомбинантной экспрессии и кристаллизации человеческого S1P5 рецептора
генетические технологии рецепторы, сопряжённые с G белком (GPCR) модификация генетических конструкций
Изобретение относится к области молекулярной биологии, генной инженерии, биотехнологиям и может быть использовано для экспрессии человеческого сфингозин-1-фосфатного рецептора типа 5 (Sphingosine-1-phosphate receptor 5, S1P5)  рецептора в клетках насекомых линии Sf9, его очистки методом металл-аффинной хроматографии и кристаллизации в липидной кубической фазе. Ген интереса оптимизирован под экспрессию в клетках насекомых, и помещен в плазмидный вектор pFastBac1 (ThermoFisher, США), содержащий гены устойчивости к антибиотикам AmpR, GmR, сайт множественного щепления рестриктазами MCS (в том числе BamHI, EcoRI, NotI, XhoI), T7R транспозон, полиэдриновый промотер, сигнальную последовательность PolyA вируса SV40, pUC ori, f1 ori. На N-конце белка помещены пептидные фрагменты: HA (однобуквенный код аминокислотной последовательности: KTIIALSYIFCLVFA – сигнальный пептид для встраивания экспрессированного белка в мембрану), Flag (однобуквенный код аминокислотной последовательности: DYKDDDD – для детектирования экспрессии антителами), линкер (однобуквенный код аминокислотной последовательности AGRA). На С-конце находятся линкер (однобуквенный код аминокислотной последовательности GRP), сайт PreScission-протеазы (однобуквенный код аминокислотной последовательности: LEVLFQGP), 10-His для очистки на смоле,  двойной ТАА стоп-кодон.
Экспрессия рецептора S1P5 для различных биофизических и структурных исследований, скрининговых тест-систем для разработки лекарственных препаратов
Валентин
Горделий
Иванович
в.н.с.
Кандидат физико-математических наук
Профессор
J-3636-2013
7003606807
0000-0001-5782-5896
РОССИЯ
Виталий
Баган
Анатольевич
проректор по научной работе
РОССИЯ
34.17.05
Методы и аппаратура в биофизике
34.17.15
Молекулярная биофизика
34.15.35
Молекулярная мембранология
34.15.15
Пространственная структура и свойства биополимеров
01.06.DR
CELL BIOLOGY
01.06.DA
BIOPHYSICS
Елизавета
Ляпина
Алексеевна
Проведение генно-инженерных работ, экспрессия и очистка белков, измерение термостабильности белка
РОССИЯ
Алексей
Мишин
Викторович
Методическое обеспечение и руководство, непосредственное руководство процессом разработки, непосредственное проведение разработки и участие в экспериментах, подготовка заявки на патент
РОССИЯ
Валентин
Борщевский
Иванович
Методическое обеспечение и руководство, непосредственное проведение разработки и участие в экспериментах, подготовка заявки на патент.
РОССИЯ
Александра
Лугинина
Павловна
Экспрессия и очистка белков, подготовка заявки на патент
РОССИЯ
Михаил
Шевцов
Борисович
Экспрессия и очистка белков, подготовка заявки на патент
РОССИЯ
Андрей
Рогачев
Вячеславович
Экспрессия и очистка белков, подготовка заявки на патент.
РОССИЯ
Егор
Марьин
Вадимович
Обработка и анализ данных
РОССИЯ
Полина
Хорн
Александровна
Обработка и анализ данных
РОССИЯ
Иван
Охрименко
Станиславович
Экспрессия и очистка белков, подготовка заявки на патент
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
МФТИ
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Московский физико-технический институт (национальный исследовательский  университет)"
1027739386135
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные автономные учреждения