Способ профилактики  аутоиммунного ревматоидного артрита у крыс в эксперименте
аутоиммунный ревматоидный артрит Тиб 1 адьювант Фрейнда перекисное окисление липидов перекисное окисление липидов антиоксидантная система каталаза
Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и может быть использовано для профилактики аутоиммунного ревматоидного артрита у крыс в эксперименте. Способ включает защиту соединительной ткани с использованием минеральной воды. Для профилактики аутоиммунного ревматоидного артрита, моделируемого подкожным введением в заднюю конечность адъюванта Фрейнда, используют газированную природную минеральную гидрокарбонатную натриево-кальциевую воду "Тиб-1", разбавленную дистиллированной водой в соотношении 1:2, которую употребляют экспериментальные животные как питьевую воду ежедневно в течение двух недель из расчета не менее 87,3 мл/кг массы тела животного. Использование изобретения позволяет снизить риски развития нарушений опорно-двигательного аппарата и продлить период активной жизнедеятельности животных за счет модификации дистрофических изменений, характерных для аутоиммунного ревматоидного артрита, под действием лечебно-столовой минеральной воды "Тиб-1". 2 ил., 1 табл.


Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине, гигиене и бальнеологии и может быть использовано при изучении механизмов профилактики аутоиммунного ревматоидного артрита.

Известна фармацевтическая композиция для профилактики ревматоидного артрита, способствующая модификации патологических признаков разрушения суставов (хрящей) и снижению индекса активности заболевания, путем терапии животных с индуцированной патологией (введение полного и неполного адъюванта Фрейнда) ребамипидом в дозе 0,6-6,0 мг/кг массы тела в течении 10 дней (см. патент RU №2496497, МПК2006 A61K 31/4704, A61K 47/00, А61Р 19/02, опубл. 27.10.2013 г.).

Недостатками аналога являются ограничения по применению ребамипида (индивидуальная непереносимость, беременность, период лактации, детский возраст до 18 лет) и побочные эффекты препарата (со стороны пищеварительной системы: запор, метеоризм, диарея, тошнота, рвота, боль в области живота, нарушение вкусовых ощущений, изжога; со стороны печени: признаки дисфункции печени, повышение сывороточной АЛТ и сывороточной ACT; со стороны системы кроветворения: лейкопения, гранулоцитопения; аллергические реакции: зуд, кожная сыпь, экзематозные высыпания; другое: нарушение менструального цикла).

Наиболее близким к данному техническому решению является способ лечения заболеваний опорно-двигательной системы, включающий защиту соединительной ткани с использованием минеральной воды (см. патент RU 2586849, МПК200601 А61Н 33/00, A61K 35/08, A61K 36/484, А61Р 19/00, опубл. 10.06.2016 г.).

Недостатками прототипа являются высокая себестоимость, связанная с необходимостью приобретения дорогостоящего бальнеологического оборудования (пеногенератора), высокий расход минеральной воды - на заполнение ванны, низкая степень проницаемости биологически активных веществ через кожу.

Технический результат предлагаемого технического решения заключается в высоком защитном (профилактическом) действии природной питьевой лечебно-столовой минеральной воды "Тиб-1", способствующей модификации дистрофических изменений, характерных для аутоиммунного ревматоидного артрита, что повышает эффективность и доступность проводимых лечебных процедур, значительно снижает риски развития нарушений опорно-двигательного аппарата и продлевает период активной жизнедеятельности животных.

Технический результат достигается тем, что в способе профилактики аутоиммунного ревматоидного артрита у крыс в эксперименте, включающем защиту соединительной ткани с использованием минеральной воды, согласно изобретению, что для профилактики аутоиммунного ревматоидного артрита, моделируемого подкожным введением в заднюю конечность адъюванта Фрейнда, используют газированную природную минеральную гидрокарбонатную натриево- кальциевую воду "Тиб-1," разбавленную дистиллированной водой в соотношении 1:2, которую употребляют экспериментальные животные как питьевую воду, ежедневно в течение двух недель из расчета не менее 87,3 мл/кг массы тела животного."

Данный способ профилактики позволит повысить эффективность и доступность проводимых процедур, значительно снизить риски развития патологии опорно-двигательного аппарата и продлить период активной жизнедеятельности животных.

Сущность способа профилактики аутоиммунного ревматоидного артрита у крыс в эксперименте поясняется таблицей гематологических и биохимических показателей крови в динамике и результатами морфологических и рентгенологических исследований профилактического действия минеральной воды "Тиб-1" на суставы, а также рисунками, где на фиг. 1 - изображены ренгенологические снимки экспериментальных животных, а) - негативный контроль; б) - позитивный контроль; в) - животные, получавшие минеральную воду "Тиб-1", разбавленную в соотношении 1:2., на фиг. 2 - морфология коленного сустава животных, а) - негативный контроль; б) - позитивный контроль; в) - животные, получавшие минеральную воду "Тиб-1", разбавленную в соотношении 1:2.

Употребление животными питьевой лечебно-столовой минеральной воды "Тиб-1" сопровождается нормализацией обменных процессов в организме, сохранением окислительно-восстановительного гомеостаза, снижением генерализованного воспалительного процесса и, как следствие, сохранением гистоархитетктоники суставного хряща, субхондральной кости и снижением степени дистрофических изменений суставного аппарата по сравнению с животными с модельной патологией [см. фиг. 1а), б), в) и фиг. 2 а), б), в)].

Механизм профилактического действия минеральной воды "Тиб-1" заключается в снижении интенсивности воспалительного процесса, обусловленного воздействием антигенов М. tuberculosis в составе полного адъюванта Фрейнда на организм теплокровных животных в динамике. Количество клеток белой крови у леченых животных снизилось относительно модельных крыс на 50% за первые две недели эксперимента. Это проявилось сохранением баланса в системе перекисного окисления липидов, играющей одну из ключевых ролей в патогенезе воспалительного процесса, в том числе - ревматоидного артрита. Формирование модельной патологии приводит к увеличению в крови животных маркера перекисной деструкции мембран - малоновогодиальдегида на 40% по сравнению с контрольными крысами (см. таблицу на I и II этапах). Введение минеральной воды "Тиб-1" способствует купированию липопероксидации на 32-35% (относительно животных с модельной аутоиммунной патологией) и стабилизации клеточных мембран, в том числе - хондроцитов. Достижению указанного эффекта способствует активация ферментного звена антиоксидантной системы - каталазы на 18%. Значительную роль в сохранности структур костно-мышечного аппарата играет нормализация минеральной водой клеточного звена системы гемостаза - тромбоцитов. Употребление животными минеральной воды способствует снижению кровяных пластинок на 5-12% относительно группы с модельной патологией, что снижает риски тромбоза и улучшает трофику тканей, в том числе - соединительной. При этом, как показали исследования, двухнедельный курс приема" Тиб-1" не оказывает воздействия на эритропоэз и содержание клеток красной крови у животных на профилактике не отличается от контроля.

Способ профилактики аутоиммунного ревматоидного артрита у экспериментальных животных осуществляется следующим образом.

Минеральную воду "Тиб-1" (газированная природная минеральная вода гидрокарбонатная натриево-кальциевая, скважина 1-3 участка тибский-3 Тибского месторождения минеральных вод республики Северная Осетия-Алания; минерализация 4-6,5 г/л, химический состав: гидрокарбонаты (НСО3-) <4500, сульфаты (SO42-) <150, хлориды (Cl-) <250, кальций (Са2+) <900, магний (Mg2+) <250, натрий + калий (Na++K+) <600) дегазируют, разбавляют дистиллированной водой в соотношении 1:2 (по объему) и заливают в поилку. Животным (крысы линии Wistar массой 400-440 г в возрасте 24 месяца, n=8) на фоне моделирования аутоиммунного ревматоидного артрита (например, введением подкожно в заднюю конечность адъюванта Фрейнда DIFCO LABORATORIES (Detroit, Michigan, США) 0,1 мл на 200 г массы тела) в режиме свободного доступа к минеральной воде проводится профилактика в течение двух недель. Затем в течение последующих пяти недель минеральная вода заменяется на обычную водопроводную и оценивается степень достигнутого лечебного эффекта. Группы сравнения: негативный контроль (интактные, n=8) и позитивный контроль (модельные животные с адъювант-индуцированным аутоиммунным ревматоидным артритом по указанной схеме, n=8). Условия содержания, режим кормления - стандартные для вивария. Оценка состояния организма осуществляется в динамике: по истечении 2-х и 7-ми недель (см. таблицу, I и II этапы). Г ематологические и биохимические исследования проводятся с использованием цельной крови животных, которую берут из сердца под общим наркозом.

Общее количество форменных элементов крови определяется с помощью автоматического гематологического анализатора Mythic 22. Для биохимических исследований кровь центрифугируют и фракционируют. В плазме определяют содержание гидроперекисей по Гаврилову, используя наборы фирмы ООО «Агат-Мед», а в эритроцитах, отмытых холодным (t=4°C) изотоническим раствором, оценивают стандартным методом содержание малоновогодиальдегида по реакции с тиобарбитуровой кислотой и изучают активность каталазы по методике, основанной на спектрофотометрическом измерении кинетики распада перекиси водорода при длине волны 230 нм. Суставный аппарат (коленный сустав) извлекают, очищают от мышечных волокон и фиксируют нейтральным 10% раствором формалина. Окраску срезов производят гематоксилин-эозином и анализируют при увеличении 10×10 и 10×40.

Обоснованность полученных выводов подтверждается статистической обработкой данных с использованием критерия Стьюдента в программе Excel, входящей в пакет Microsoft Office 2016.

Способ обеспечивает купирование патобиохимических и патоморфологических изменений в организме на фоне аутоиммунных заболеваний и способствует модификации клинических признаков при патологии суставов воспалительного и дистрофического характера.

Использование предлагаемого способа профилактики аутоиммунного ревматоидного артрита у крыс в эксперименте позволит по сравнению с прототипом повысить эффективность и доступность проводимых процедур, оказывающих хондропротекторный эффект, что значительно снизит риски системных и локальных поражений соединительной ткани и продлит период активной жизнедеятельности животных.

Результаты биохимических и гематологических исследований профилактического действия минеральной воды "Тиб-1"
Клиническая медицина
Сергей
Скупневский
Валерьевич
зав. отделом
Доктор биологических наук
Отсутствует
K-3813-2017
57216938446
149191
https://www.elibrary.ru/author_profile.asp?id=149191
0000-0002-6233-5944
РОССИЯ
Алексей
Чибиров
Людвигович
Директор
РОССИЯ
76.03.53
Патологическая физиология
03.01.UM
PHYSIOLOGY
Фатима
Руруа
Карловна
Исполнитель
РОССИЯ
Сергей
Скупневский
Валерьевич
Руководитель
РОССИЯ
Алибек
Бадтиев
Кириллович
Исполнитель
РОССИЯ
Елена
Пухаева
Георгиевна
Исполнитель
РОССИЯ
Фатима
Батагова
Эльбрусовна
Исполнитель
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ВНЦ РАН
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР "ВЛАДИКАВКАЗСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК"
1021500511878
АЛЕКСЕЙ
ЧИБИРОВ
ЛЮДВИГОВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения