СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕТЕРОГЕННОГО БИОКАТАЛИЗАТОРА НА ОСНОВЕ ЛИПАЗЫ, ИММОБИЛИЗОВАННОЙ НА КАТИОНООБМЕННЫХ СМОЛАХ КУ-2-8 В Н-ФОРМЕ
КУ-2-8 КУ-2 иммобилизация катионообменные смолы липаза
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ получения гетерогенного биокатализатора на основе липазы, иммобилизованной на катионообменных смолах, включающий адсорбционную иммобилизацию липазы в буферном растворе на матрицу катионообменника в процессе инкубации при комнатной температуре с периодическим перемешиванием, отделение внешнего раствора от иммобилизованной липазы на катионообменнике, промывку образовавшегося биокатализатора буфером; при этом перед иммобилизацией катионообменник в Н-форме выдерживают в течение 12 ч при комнатной температуре в буфере, из расчета на 1 г катионообменника используют 20 мл буфера, иммобилизацию ведут путем добавления к суспензии катионообменной смолы КУ-2-8 в буфере 10 мл раствора липазы из поджелудочной железы свиньи в буфере в концентрации липазы 1 мг/мл, в качестве буферного раствора для иммобилизации используют 0,05М фосфатный буфер с рН 5,8, после чего осуществляют инкубацию при перемешивании с помощью электрической мешалки со скоростью 250 об/мин в течение 1,5 ч, затем отделение внешнего раствора от иммобилизованной липазы на катионообменнике проводят путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение 5 мин и декантации внешнего раствора; промывку образовавшегося биокатализатора осуществляют с помощью диализа с использованием целлофанового мешочка Spectra/Por 6 Standard RC, шириной 34 мм, вместимостью 3,7 мл на 1 см длины, с диаметром пор 25 кДа против 0,2М фосфатно-цитратного буфера, рН 6,5, из расчета, что для промывки 1 г полученного биокатализатора используют 400 мл 0,2М фосфатно-цитратного буфера с рН 6,5, диализ ведут в течение 8 часов, после чего буфер меняют на порцию буфера в объеме 400 мл и продолжают диализ еще в течение 16 часов до отсутствия в промывном растворе свободной липазы.
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в пищевой промышленности для гидролиза молочного жира, для производства и улучшения качества сыров.
Сергей
Турищев
Юрьевич
Доцент
Доктор физико-математических наук
Доцент
M-2088-2016
8058378900
107907
0000000333201979
РОССИЯ
Дмитрий
Ендовицкий
Александрович
Ректор
РОССИЯ
34.17.15
Молекулярная биофизика
01.06.DA
BIOPHYSICS
Марина
Холявка
Геннадьевна
РОССИЯ
Валерий
Артюхов
Григорьевич
РОССИЯ
Светлана
Гончарова
Сергеевна
РОССИЯ
Юлия
Редько
Александровна
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГБОУ ВО "ВГУ"
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "ВОРОНЕЖСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ"
1023601560510
ДМИТРИЙ
ЕНДОВИЦКИЙ
АЛЕКСАНДРОВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения