Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli Rosetta 2(DE3)/pET28с-TstP36H-Sso7d – продуцент химерной термостабильной ДНК-полимеразы TstP36H-Sso7d из Thermococcus stetteri
Термостабильная ДНК-полимераза рекомбинантный препарат фермента полимеразная цепная реакция
Предложен штамм бактерий Escherichia coli Rosetta 2(DE3)/pET28c-TstP36H-Sso7d, являющийся продуцентом рекомбинантной химеры термостабильной ДНК-полимеразы семейства B из Thermococcus stetteri и ДНК-связывающего белка Sso7d из Sulfolbus solfataricus. Указанный штамм получают путем трансформации клеток Escherichia coli штамма Rosetta 2(DE3) плазмидой pET28c-TstP36H-Sso7d, сконструированной на основе вектора pET28c, содержащего ориджин репликации f1, промотор фага T7, RBS-сайт посадки рибосомы, сайты рестрикции NdeI и NotI, по которым встроен фрагмент гена, кодирующего ДНК-полимеразу В из Thermococcus stetteri, содержащую аминокислотную замену P36H и слитую с ДНК-связывающим белком Sso7d из Sulfolbus solfataricus, гистидиновую метку His-tag, терминатор фага T7, ген устойчивости к канамицину KanR, а также лактозный репрессор lacI и лактозный оператор. Технический результат изобретения заключается в получении рекомбинантного штамма-продуцента, обеспечивающего получение рекомбинантной ДНК-полимеразы TstP36H-Sso7d с чистотой 95% и с более высокой процессивностью по сравнению с ферментом дикого типа.
биотехнология, молекулярная биология, полимеразная цепная реакция
34.15.15
Пространственная структура и свойства биополимеров
34.15.27
Генетическая инженерия
31.27.15
Структура и функции биополимеров
Никита
Кузнецов
Александрович
"Доктор химических наук"
"Отсутствует"
"F-3245-2011"
"7201470827"
"7060-3990"
"0000-0002-4016-198X"
РОССИЯ
Марина
Соловьева
Андреевна
"Отсутствует"
"Отсутствует"
"-"
"-"
"-"
"-"
РОССИЯ
Елена
Микушина
Сергеевна
"Отсутствует"
"Отсутствует"
"-"
"-"
"-"
"-"
РОССИЯ
Александра
Кузнецова
Александровна
"Кандидат химических наук"
"Отсутствует"
"G-5119-2013"
"36906942600"
"150160"
"0000-0002-9805-7050"
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ИХБФМ СО РАН
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ХИМИЧЕСКОЙ БИОЛОГИИ И ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ СИБИРСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК
1025403659852
ДМИТРИЙ
ПЫШНЫЙ
ВЛАДИМИРОВИЧ
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения