Способ получения димерной формы иммуноглобулина IgA1-изотипа в клетках млекопитающих
рекомбинантная плазмидная ДНК последовательности генов тяжелой и легкой цепей иммуноглобулина А антитела изотипа A1 в виде димера с J-цепью вирус SARS-CoV-2 (2019-nCoV) терапевтические средства
Изобретение относится к области биотехнологии. Описана рекомбинантная плазмидная ДНК p3.4-P4A1IgA1-J12His-ht, кодирующая нейтрализующее моноклональное антитело P4A1 к вирусу SARS-CoV-2 изотипа IgA1 и J-цепь человека, содержащая сплайсированный ген тяжелой цепи антитела с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:2, кодирующей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1, находящийся под контролем промотора hEF1-HTLV с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:8 и сигнала полиаденилирования бычьего гормона роста BGH polyA с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:9, ген легкой цепи антитела с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:4, кодирующей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:3, и ген J-цепи человека с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:6, кодирующей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5, находящиеся под контролем промотора CMV с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:7 и внутреннего сайта связывания рибосом (IRES) вируса энцефаломиокардита (EMCV) с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:10, посттранскрипционный регуляторный элемент WPRE вируса гепатита сурка (WHV) и сигнал полиаденилирования тимидинкиназы вируса герпеса, при этом промоторы hEF1-HTLV и CMV размещены в последовательности, обеспечивающей однонаправленную транскрипцию. Также описан способ получения эукариотических клеток, продуцирующих димер нейтрализующего моноклонального антитела P4A1 против вируса SARS-CoV-2 (2019-nCoV) изотипа IgA1 с J-цепью в культивируемых клетках яичника китайского хомячка СНО, включающий: трансфекцию клеток СНО описанными рекомбинантными плазмидными ДНК, последующее культивирование в питательной среде, выделение полученного целевого димерного антитела P4A1 к вирусу SARS-CoV-2 изотипа IgA1 из культуральной жидкости. Выход продукции в культуральную жидкость димера нейтрализующего моноклонального антитела P4A1 против вируса SARS-CoV-2 (2019-nCoV) мутантного изотипа IgA2m1 с составил 5.2 мкг в мл кондиционированной среды.
2 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 ил., 9 табл., 3 пр.
Предложена рекомбинантная плазмидная ДНК, позволяющая осуществлять транскрипцию и трансляцию кодирующей последовательности генов тяжелой и легкой цепей иммуноглобулина А и J-цепи для последующего получения клеток эукариот, экспрессирующих антитела изотипа A1 в виде димера с J-цепью, которые могут быть использованы при производстве терапевтических средств (препаратов и вакцин), в том числе против вируса SARS-CoV-2 (2019-nCoV).
34.57.21
Материалы для биомедицинского применения
62.37.41
Интерфероны, лимфокины и другие иммунологические и противораковые препараты, полученные на основе генетической инженерии
Теймур
Алиев
Кантамирович
"Кандидат химических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Дмитрий
Балабашин
Сергеевич
"Кандидат биологических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Дмитрий
Долгих
Александрович
"Доктор биологических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Михаил
Кирпичников
Петрович
"Доктор биологических наук"
"Академик"
"F-2655-2014"
"7005699025"
"84983"
"https://istina.msu.ru/workers-beta/410786/"
"0000-0001-8170-1607"
РОССИЯ
Мария
Ларина
Викторовна
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Виктория
Топорова
Александровна
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ИБХ РАН
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук
1037739009110
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения