Рекомбинантная плазмида pNhaDAAO, обеспечивающая синтез оксидазы обычных и  N-замещенных  D-аминокислот (NhaDAAO) архей Natrarchaeobius halalkaliphilus AArcht4 в клетках Escherichia coli и рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3)/pNhaDAAO ВКПМ В-14556 - продуцент NhaDAAO
Формиатдегидрогеназа метилотрофные дрожжи Hansenula polymorpha DL-1 рекомбинантный штамм-продуцент E.coli экспрессия стабильность
Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, в частности к генетической инженерии, и может быть использовано в различных областях различных областях науки и техники – фармацевтическая промышленность, тонкий органический синтез, определение концентраций формиата и кофермента НАД+ в сложных биологических смесях (включая жидкости и ткани человека), для создания биокатализаторов фиксации СО2 из атмосферы и др. Для достижения указанных целей сконструирована рекомбинантная плазмидная ДНК pHpFDH_HisA, содержащая модифицированный ген hpfdh_hisa, кодирующий мутантную `НАД+ зависимую формиатдегидрогеназу c дополнительной на N-конце фермента последовательностью из шести остатков гистидина и одного остатка аланина. Введение на N -конец фермента дополнительной последовательности His6Ala приводит к повышению термостабильности и позволяет в одну стадию получать препараты высокоочищенного фермента. Для обеспечения высокой эффективности экспрессии в целевом штамме-продуценте в модифицированном гене HpFDH_HisA в качестве стоп кодона используется тандем триплетов TAATAA вместо триплета TGA в исходном гене. Полученная плазмида позволяет проводить экспрессию, включенного в нее гена hpfdh_hisa в клетках Escherichia coli. В результате трансформации штамма E.coli BL21(DE3) предложенной плазмидой получен новый рекомбинантный штамм-продуцент E.coli BL21(DE3))/pHpFDH_HisA ВКПМ В-14559, обеспечивающий суперэкспрессию HpFDH_HisA в активной форме.
Аналитическая биотехнология
62.39.51
Ферменты и ферментативные процессы в науке, технике и промышленности
62.09.39
Микроорганизмы-продуценты для биотехнологического производства
Владимир
Тишков
Иванович
"Доктор химических наук"
"Профессор"
"J-6769-2012"
"35413505700"
"186523"
"https://istina.msu.ru/profile/tishkov/"
"0000-0002-6997-7229"
РОССИЯ
Денис
Атрошенко
Леонидович
"Кандидат химических наук"
"Отсутствует"
"ABA-4667-2020"
"57191288737"
"1"
"https://istina.msu.ru/profile/atrdenis/"
"0000-0003-2100-4118"
РОССИЯ
Диана
Головина
Игоревна
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Александр
Ельченинов
Геннадьевич
"Кандидат биологических наук"
"Отсутствует"
"AAD-2770-2019"
"57196353876"
"-"
"0000-0003-1686-6119"
РОССИЯ
Анастасия
Пометун
Александровна
"Кандидат химических наук"
"Отсутствует"
"1"
"1"
"1"
"1"
РОССИЯ
Святослав
Савин
Сергеевич
"Кандидат биологических наук"
"Отсутствует"
"GMX-3327-2022"
"24333205000"
"122833"
"https://istina.msu.ru/profile/slavas/"
"0000-0002-0788-2507"
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ М.В.ЛОМОНОСОВА"
1037700258694
ВИКТОР
САДОВНИЧИЙ
АНТОНОВИЧ
Организация
Правительство Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения