Способ получения надропарина кальция
фармацевтическая технология готовая лекарственная форма активная фармацевтическая субстанция Надропарин кальция
Изобретение относится к области химии, а именно к способу получения надропарина кальция, при котором гепарин натрия растворяют в воде, охлаждают, доводят рН раствора до 2,45-2,55 и добавляют нитрит натрия, затем доводят значение рН реакционной массы до 9,9-10,7, после чего в раствор добавляют борогидрид натрия, затем доводят рН реакционной массы до 3,8-4,0, после чего реакционную массу доводят до рН 6,7-6,9, затем к раствору добавляют этиловый спирт, перемешивают и оставляют до осаждения масла, раствор декантируют, оставшееся масло перемешивают в этиловом спирте до образования твердого рассыпчатого осадка, который фильтруют, получают надропарин натрия, затем сухой надропарин натрия растворяют в растворе фосфатного буфера и проводят концентрирование раствора, проводят ионообмен путем пропускания раствора через слабокислый катионит с получением полупродукта, к которому добавляют суспензию кальция гидроксида, после этого доводят рН до 6,8 и осуществляют выпаривание раствора, затем проводят лиофилизацию надропарина кальция. Технический результат заключается в увеличении выхода низкомолекулярного гепарина за счет повышения избирательности его фракционирования с использованием ультрафильтрации. 2 пр.


Область техники.

Изобретение относится к технологии получения фармацевтической субстанции низкомолекулярного гепарина (НМГ), такого как надропарин кальция, и может быть использовано для производства лекарственных препаратов на его основе.

Уровень техники.

Гепарин представляет собой антикоагулянт прямого действия, который синтезируется тучными клетками, являющимися разновидностью клеточных элементов соединительной ткани. В связи с этим важнейшим источником для получения гепарина в фармакологических и медицинских целях является ткань легких и печени животных методом протеолиза или деполимеризации с последующей очисткой гепарина-сырца.

Гепарин является линейным гетерополисахаридом, построенным из чередующихся остатков a-D-глюкопиранозилуроновой(глюкуроновой)кислоты и 2-сульфамино-2-дезокси-а-D-глюкопиранозы (сульфатированного N-ацетилглюкозамина), связанных а-1,4-гликозидными связями. Кроме сульфатных групп гепарин содержит и сульфоэфирные группы (при С6 остатков сульфо-N-глюкозамина и, частично, при С2 глюкуроновой кислоты).

Для медицинских целей получают два типа гепарина: высокомолекулярный (ВМГ) и низкомолекулярный (НМГ) гепарины.

В настоящее время широкое применение получили препараты низкомолекулярного гепарина (НМГ), которые имеют достаточно высокую активность по фактору антикоагулянтной активности анти-Ха и низкую по анти-IIа активности (В.А. Макаров и др., “Применение гепаринов в клинической практике”, 1998, РМЖ, №3, с. 4).

В частности, используются препараты на основе субстанций дальтепарина, тинзапарина и эноксапарина натрия, надропарина, которые отличаются высокой антикоагуляционной активностью и имеют наиболее широкий спектр показаний.

Одним из таких препаратов на основе НМГ является надропарин кальция.

Используемый в качестве лекарственного препарата надропарин представляет собой кальциевую соль деполимеризованного гепарина с молекулярной массой от 4000 до 5000 Да.

Он обладает прямым антикоагуляционным действием, анти-Ха и анти-IIа активностью, непосредственно влияет на находящиеся в крови факторы свертывания. Усиливает блокирующий эффект антитромбина III на фактор Ха (активирует переход протромбина в тромбин). Анти-Ха активность приблизительно в 4 раза превосходит анти-IIа активность. Обладает противовоспалительными и иммуносупрессивными (подавляет кооперативное взаимодействие Т- и В-клеток) свойствами, незначительно понижает уровень холестерина и бета-липопротеидов в сыворотке крови.

Улучшает коронарный кровоток.

Применяется при тромбозах глубоких вен, тромбоэмболии легочной артерии, остром коронарном синдроме, профилактике тромбозов у больных с высоким риском: а) при ортопедических, онкологических и общехирургических операциях, б) при гемодиализе и гемофильтрации у больных с хронической почечной недостаточностью.

Известно несколько способов получения надропарина кальция.

Так, известен способ, включающий деполимеризацию гепарина с получением НМГ. Далее проводят процесс очистки, в котором выполняется устранение нитрозных групп путем нагревания водного раствора, содержащего низкомолекулярный гепарин при рН, составляющем от 3,0 до 13,0 при температуре, составляющей от 40°С и 90°С; в течение времени от 15 минут до 180 минут, или путем обработки водного раствора, содержащего низкомолекулярный гепарин излучением с помощью микроволн с частотой, находящейся между 900 и 2450 МГц при мощности 600-1000 Вт, в течение периода времени между 30 и 300 секунд (Европейский патент ЕР 1773890, опубликован 18.04.2007).

Недостатком данного способа является высокая степень деградации продукта при высокотемпературной или микроволновой обработке в условиях низкого рН.

Также известен способ получения надропарина кальция, заключающийся в том, что гепарин растворяют в воде, добавляют нитрит натрия и доводят рН раствора до 2-3 путем обработки соляной кислотой, выдерживают раствор до исчезновения нитрита и затем доводят рН раствора до 9-11 путем добавления гидроксида натрия, после чего в раствор вводят борогидрид натрия, реакционную смесь перемешивают несколько часов, избыток борогидрида натрия разрушают соляной кислотой, а полученную реакционную среду нейтрализуют, после чего осуществляют осаждение, для чего добавляют этанол и выдерживают несколько часов, отделяют выделившийся продукт центрифугированием, к супернатанту добавляют спирт, перемешивают несколько часов, получившийся первый продукт отфильтровывают, промывают спиртом и сушат, после чего осадок опять растворяют в воде, добавляют нитрит натрия и доводят рН раствора до 2-3 путем обработки соляной кислотой, выдерживают раствор до исчезновения нитрита и затем доводят рН раствора до 9-11 путем добавления гидроксида натрия, после чего в раствор вводят борогидрид натрия, реакционную смесь перемешивают несколько часов, избыток борогидрида натрия разрушают соляной кислотой, а полученную реакционную среду нейтрализуют, после чего осуществляют осаждение для чего добавляют этанол и выдерживаютнесколько часов, отделяют выделившийся продукт центрифугированием, к супернатанту добавляют спирт, перемешивают несколько часов, получившийся второй продукт отфильтровывают, промывают спиртом и сушат, затем первый и второй сухой продукт растворяют в воде, пропускают через сильнокислый катионит, элюат доводят раствором гидроксида кальция до рН 6,6-7,2, фильтруют и сушат методом сублимационной сушки (лиофилизация) или с применением вакуумных сушильных шкафов (патент RU 2639574 С2, опубликован 28.11.2017).

Недостатком данного способа является низкая избирательность фракционирования по молекулярной массе и связанные с этим потери продукта при спиртовом переосаждении.

Наиболее близким аналогом заявляемого изобретения является способ получения надропарина кальция, заключающийся в том, что проводят растворение гепарина натрия в воде и добавление нитрита натрия, полученную реакционную массу перемешивают 60-90 минут, доводят значение рН до 10, после чего в раствор добавляют борогидрид натрия и этиловый спирт, перемешивают до осаждения масла, раствор декантируют, оставшееся масло перемешивают в этиловом спирте, осадок отфильтровывают и сушат. Затем проводят переосаждение надропарина натрия, к которому приливают воду, добавляют сильнокислый катионит в кальциевой форме, выдерживают 2 часа. Полученный раствор фильтруют, смолу промывают водой и подвергают сушке, получая надропарин кальция. Далее полученный надропарин кальция растворяют в воде и приливают этиловый спирт при температуре 20°С. Реакционную массу центрифугируют, после декантируют раствор с выпавшего масла, которое упаривают до образования порошка, который дополнительно сушат в вакуумном сушильном шкафу при температуре 30°С течение 72 часов, получая надропарин кальция необходимой фракции (патент на изобретение RU 2753678 С1, опубл. 19.08.2021).

Недостатком указанного способа является, как и в предыдущем способе, использование большого количества этанола и относительно низкий выход продукта, связанный с низкой избирательностью процесса спиртового переосаждения.

Задачей, решаемой с помощью заявляемого изобретения, является увеличение выхода низкомолекулярного гепарина за счет повышения избирательности его фракционирования с использованием тангенциальной ультрафильтрации.

Для решения этой задачи мы предлагаем способ получения надропарина кальция, при котором гепарин натрия растворяют в воде, охлаждают реакционную массу до температуры 15°С, доводят рН раствора до 2,5±0,05 концентрированной соляной кислотой и добавляют нитрит натрия, реакционную массу перемешивают 90 минут, по окончании перемешивания доводят значение рН реакционной массы до 10,3±0,4 путем добавления водного раствора гидроксида натрия, после чего в раствор добавляют борогидрид натрия и перемешивают реакционную массу в течение 2 часов, по окончании перемешивания доводят рН реакционной массы до 3,9±0,1 при помощи концентрированной соляной кислоты и перемешивают еще 20 минут при температуре 15°С, после чего реакционную массу доводят до рН 6,8±0,1 водным раствором гидроксида натрия, затем к раствору добавляют этиловый спирт, перемешивают 5 минут и оставляют на 300 мин при температуре 15°С до осаждения масла, раствор декантируют, оставшееся масло перемешивают в этиловом спирте до образования твердого рассыпчатого осадка, который фильтруют, получают надропарин натрия,

затем сухой надропарин натрия растворяют в 0,2 М растворе фосфатного буфера, перемешивают и проводят концентрирование раствора при входном давлении 1,5-1,6 бара через мембрану 30 кДа, до объема в 5 раз меньше исходного, затем последовательно промывают концентрат 0,2 М раствором фосфатного буфера и водой очищенной до достиженияэлектропроводности в линии фильтрата не более 50 мкСм/см фильтрат собирают в отдельный сборник,

полученный фильтрат концентрируют на мембране 5кДа, при входном давлении 3 бара, и последовательно промывают 0,2 М раствором фосфатного буфера и водой очищенной до достижения электропроводности в линии фильтрата не более 50 мкСм/см,

полученный концентрат сливают в сборник и проводят ионообмен в полученном продукте путем пропускания раствора через слабокислый катионит,

к полученному полупродукту добавляют расчетное количество суспензии кальция гидроксида при перемешивании, после этого доводят рН раствора до значения 6,8 и осуществляют выпаривание раствора надропарина кальция при температуре не выше +40°С, остаточном давлении 30 мбар, затем проводят лиофилизацию надропарина кальция.

Способ осуществляется следующим образом.

Гепарин натрия растворяют в воде, охлаждают реакционную массу до температуры 15°С, доводят рН раствора до 2,5±0,05 концентрированной соляной кислотой и в один прием добавляют нитрит натрия, реакционную массу перемешивают 60-90 минут, по окончании перемешивания доводят значение рН реакционной массы до 10 путем добавления водного раствора гидроксида натрия, после чего в раствор добавляют борогидрид натрия и перемешивают реакционную массу в течение 2 часов, по окончании перемешивания доводят рН реакционной массы до 3,9-4,0 при помощи концентрированной соляной кислоты и перемешивают еще 20 минут, после чего реакционную массу нейтрализуют до рН 7,0 водным раствором гидроксида натрия, затем к раствору добавляют этиловый спирт, перемешивают 10 минут и оставляют на 300 мин до осаждения масла, раствор декантируют, оставшееся масло (не закристаллизовавшеесявещество) перемешивают в этиловом спирте, осадок отфильтровывают и сушат на воздухе до постоянной массы, получают надропарин натрия,

Затем проводят ультрафильтрацию надропарина натрия в 2 стадии: 1 стадия - ультрафильтрация через мембрану 30 к Да. В циркуляционный реактор через загрузочное окно наливают 0,2 М фосфатный буфер и засыпают сухой надропарин натрия, полученный на предыдущей стадии. Включают встроенную мешалку и запускают перемешивание до полного растворения сухого продукта, контроль визуальный.

Затем проводят концентрирование раствора при входном давлении 1,5-1,6 бара по манометру, установленному на входе в модуль мембранного разделения через мембрану 30 кДа.

Таким образом, в начале этой стадии раствор в циркуляционном реакторе концентрируют до объема в 5 раз меньше исходного.

К полученному концентрату добавляют 0,2 М фосфатный буфер в объеме 1:4,5 и концентрируют до исходного объема концентрата. Проводят три таких цикла разбавления-концентрирования, собирая фильтрат в коллектор целевой фракции. После последнего цикла раствор в циркуляционном реакторе концентрируют до исходного объема концентрата.

После этого проводят промывку концентрата полученного продукта от солей буфера. Для этого в циркуляционный реактор с концентратом добавляют воды очищенной в объеме 1:1 и концентрируют до исходного объема концентрата. После этого процедуру промывки повторяют. Получаемый в процессе фильтрат собирается в коллектор целевой фракции. Промывки концентрата водой очищенной повторяют до достижения электропроводности в линии фильтрата не более 50 мкСм/см. После достижения указанного значения электропроводности раствор в циркуляционном реакторе концентрируют до исходного объема концентрата и полученный концентрат сливают в емкость для сбора концентрата.

Параметры ультрафильтрации:

• давление на линии входа 1,5-1,6 бар;

• электропроводность после промывки в линии фильтрата - не более 50 мкСм/см.

2 стадия - ультрафильтрация полученного фильтрата на мембране 5кДа.

В коллекторе целевой фракции с собранным в нем фильтратом с предыдущей стадии, включают перемешивающее устройство и циркуляционный насос. Концентрирование раствора проходит при входном давлении 3 бар по манометру, установленному на входе в модуль мембранного разделения с мембраной 5 кДа. Фильтрат разбавляют 0,2 М раствором фосфатного буфера в соотношении 1:2 и вновь концентрируют до исходного объема фильтрата. Проводят два таких цикла разбавления-концентрирования.

После этого проводят промывку полупродукта от солей буфера. К полученному концентрату в коллекторе целевой фракции, при включенном перемешивающем устройстве, приливают воды очищенной в объеме 1:1 и концертируют до исходного объема концентрата. После этого процедуру промывки повторяют. Получаемый в процессе фильтрат также собирают в коллектор фильтрата. Промывки концентрата водой очищенной повторяют до достижения электропроводности в линии фильтрата не более 50 мкСм/см. После достижения указанного значения электропроводности полупродукт концентрируют до исходного объема концентрата. Полученный концентрат сливают в емкость для сбора полупродукта (концентрата).

Параметры ультрафильтрации с мембраной 5 кДа:

• давление на линии входа - 3 бара;

• электропроводность в линии фильтрата - не более 50 мкСм/см.

Целевой сбор - концентрат (раствор надропарина натрия). Отход -фильтрат.

После этого проводят ионообмен в полупродукте надропарина натрия, полученном на предыдущей стадии.

Установка для ионообмена состоит из двух последовательно соединенных и пронумерованных колонн, заполненных готовой ионообменной смолой. Продукт с предыдущей стадии подают в установку для ионообмена со скоростью 50 мл/мин, прогоняя его через две последовательно соединенных колонны, заполненных готовой ионообменной смолой. После прохождения через ионообменные колонны заряженный полупродукт попадает в промежуточную емкость. После этого установку для ионообмена продувают сжатым воздухом для удаления остатков раствора и промывают водой очищенной.

Следующим этапом проводят синтез надропарина кальция.

Для этого продукт стабилизируют внесением в его раствор 0,1М кальция гидроксида при перемешивании мешалкой на скорости 50 об/мин и доводят рН до 6,8±0,2.

По завершении подачи кальция гидроксида перемешивают полученный раствор еще в течение 10 мин.

После этого осуществляется выпаривание раствора надропарина кальция. Раствор упаривают при температуре рубашки реактора +40°С, остаточном давлении 30 миллибар, скорость вращения мешалки составляет 50 об/мин.

После этого проводят лиофилизацию надропарина кальция в лиофильной сушилке. Бутылки с замороженным раствором размещают в рабочей камере лиофильной сушилки.

Процесс высушивания автоматический и не требует ручной корректировки. По завершении высушивания сбрасывают вакуум из рабочей камеры сушилки. Открывают дверь рабочей камеры, выгружают бутылки и закрывают резиновыми пробками.

Изобретение подтверждается следующими примерами.

Пример 1.

200 г гепарина растворяли в воде очищенной. С помощью пипетки и мерного цилиндра, добавляли в емкость 10% раствор соляной кислоты, доводя рН реакционной массы до значения 2,5±0,05. По окончании добавления соляной кислоты в емкость через химическую воронку в один прием загрузили 7 г нитрита натрия и выдерживали массу в емкости при перемешивании в течение 90 мин, при температуре +15±1°С, частота перемешивания 38 Гц. Разброс значений температуры и рН обусловлен допустимой основной погрешностью средств измерений данного типа.

Затем добавляли в емкость 0,2М раствор гидроксида натрия, доводя рН реакционной массы до значения 10. По окончании загрузки раствора гидроксида натрия в емкость добавляли через химическую воронку в один прием 2 г боргидрида натрия и выдерживали массу в емкости при перемешивании в течение 2 часов при температуре +15±1°С.

По окончании времени выдержки включали мешалку с частотой перемешивания 38 Гц. С помощью пипетки добавляли в емкость 10% раствор соляной кислоты, доводя рН реакционной массы до значения 3,9±0,1. Массу в емкости выдерживали при перемешивании в течение 20 мин при температуре +15±1°С.

По окончании времени выдержки добавляли в емкость 0,2 М раствор гидроксида натрия, доводя рН реакционной массы до значения 6,8±0,1. Контроль температуры+15±1°С. Приливали с помощью сифона и перистальтического насоса точно 6,496 кг этилового спирта. Раствор перемешивали в течение 5 мин, после этого отключали перемешивание и оставляли до осаждения масла на 5 часов, при этом температуру реакционной массы выдерживали при +15±1°С.

Спустя 5 часов декантировали раствор над маслом, с использованием сифона и сливали его в сборник. Приливали к остатку в емкости с помощью мерного цилиндра через химическую воронку 6 л этилового спирта. Включали мешалку (частота перемешивания 38 Гц, время 30 мин) и перемешивали содержимое до образования твердого рассыпчатого осадка.

В вакуумно-фильтрационную установку укладывали плоский бумажный фильтр тип «белая лента». На фильтр помещали извлеченный из емкости осадок и спиртовой раствор. Фильтровали полученный осадок. Собранный фильтрат помещали в сборник. По завершении фильтрации из установки извлекли фильтр с полупродуктом - осадком надропарина натрия. Продукт переносили с фильтра в стерильный одноразовый флакон. Передавали выемку полупродукта (надропарина натрия) (50 мг) на анализ в лабораторию контроля качества.

Полученный полупродукт помещали в циркуляционный реактор ультрафильтрационой установки и приливали 24,8 л 0,2 М фосфатного буфера, перемешивали до полного растворения полупродукта, поле чего полученный раствор концентрировали на мембране с порогом отсечения 30 кДа, при входном давлении 1,5-1,6 бара, до объема 6 л. Полученный концентрат разбавляли 24,8 л 0,2 М фосфатного буфера при перемешивании и вновь концентрировали до объема 6 л, количество таких циклов разбавления-концентрирования 4. После этого к оставшемуся концентрату приливали 5 л воды очищенной и вновь концентрировали его до исходного объема (6 л), после чего операцию повторяли, контролируя значение электропроводности фильтрата. Промывки водой проводили до достижения значения электропроводности ниже Увеличенное изображение (открывается в отдельном окне) после чего концентрат финально концентрировали до 6 л.

Полученный полупродукт - фильтрат с мембраны 30 кДа -собранный в коллектор целевой фракции ультрафильтрационой установки, концентрировали на мембране 5 кДа, при входном давлении 3 бар, до объема 6 л, концентрат разбавляли 12,4 л 0,2 М фосфатного буфера и вновь концентрировали до 6 л, количество таких циклов разбавления-концентрирования 2. После этого к оставшемуся концентрату (6 л) приливали 4 л воды очищенной и вновь концентрировали его до исходного объема 6 л, повторяли промывки водой до достижения электропроводности фильтрата ниже Увеличенное изображение (открывается в отдельном окне) (фактическое значение Увеличенное изображение (открывается в отдельном окне) концентрат финально концентрировали до 6 л и сливали с коллектора целевой фракции в сборник. После этого установку промыли 3 л очищенной воды.

Полученный концентрат с мембраны 5 кДа упаривали в роторном испарителе.

1 грамм полученного полупродукта растворили в 100 мл воды очищенной. Полученный раствор при помощи перистальтического насоса перекачали в ионообменную установку, наполненную слабокислотным катионитом Токем-250, со скоростью 50 мл/мин, по окончании перегонки всего объема добавляли воду очищенную до полного заполнения установки. По завершению полного заполнения установки выдерживали 30 минут и слили полупродукт со скоростью 50 мл/мин в приемную емкость. По завершении установку продували сжатым воздухом. Сверху в установку подавали воду, очищенную в соотношении 1 часть воды на 3,35 частей общего объема смолы. Далее продували установку сжатым воздухом для осушения. Повторили эту процедуру еще один раз.

Кальцификацию полупродукта проводили следующим образом: к полученному раствору добавили 217 мг кальция гидроксида (в виде ОДМ водной суспензии) и перемешали до полного растворения под контролем рН раствора. После растворения всего расчетного количества гидроксида кальция, довели рН раствора до значения 6,8 добавлением раствора 10% соляной кислоты. Полученный раствор надропарина сконцентрировали на роторном испарителе, заморозили и высушили в лиофильной сушилке.

Пример 2. Определение показателей качества получаемого продукта. По результатам анализа установлено, что показатели качества продукта соответствуют установленным требованиям:

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде.

Подлинность:

1) ЯМР-спектр - подобен спектру стандартного образца надропарина кальция;

2) Отношение активности антифактор-Ха к активности антифактор-IIа-3,14;

3) Среднемассовая молекулярная масса - 4220 Да.

Фракции меньше 2000 Да - 9%;

Фракции от 2000 до 4000 Да - 41%. Фракции от 2000 до 8000 Да - 86%;

4) Качественная реакция на кальций - положительна.

Прозрачность раствора. 5% раствор субстанции выдерживает сравнение с эталоном П.

Цветность раствора. 5% раствор субстанции должен выдерживает равнение с эталоном Y5.

рН. - 6,03

Свободные сульфаты. - 0,15%.

Нитриты. Выдерживает испытание.

Кальций. 9,89%.

Азот.2,3%.

Молярное соотношение сульфат-ионов и карбоксилат-ионов. - 4,3.

Потеря в массе при высушивании. 3,055%.

Тяжелые металлы. Выдерживает испытание.

Этанол. Выдерживает испытание.

Бактериальные эндотоксины. Менее 0,01 ЕЭ на ME анти-Ха-факторной активности.

Аномальная токсичность. Субстанция не токсична.

Микробиологическая чистота. Соответствует категории 1.2Б.

Количественное определение. Анти-Ха-факторная активность 111,5 МЕ/мг в пересчете на сухое вещество.
Производство лекарственных средств на основе Надропарина кальция
61.45.15
Исследования и разработки в области технологии химико-фармацевтических средств
Георгий
Александров
Васильевич
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Александр
Руденко
Вячеславович
"Кандидат экономических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Артем
Гурьев
Михайлович
"Доктор фармацевтических наук"
"Отсутствует"
"P-5080-2016"
"57194541508"
"55439"
"https://ssmu.ru/ru/cvt/"
"0000-0002-1120-4979"
РОССИЯ
Сергей
Кривощеков
Владимирович
"Кандидат химических наук"
"Доцент"
"C-5478-2014"
"56021963300"
"770179"
"https://ssmu.ru/ru/cvt/cvtscientist/"
"0000-0003-4213-2389"
РОССИЯ
Николай
Шубин
Сергеевич
"Отсутствует"
"Отсутствует"
"0000-0002-6264-4632"
РОССИЯ
Алексей
Александров
Георгиевич
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Евгений
Маковский
Викторович
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Сергей
Аракелов
Александрович
"Кандидат биологических наук"
"Отсутствует"
РОССИЯ
Илья
Меркулов
Вадимович
"Отсутствует"
"Отсутствует"
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Петр
Мордовской
Григорьевич
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ООО "ФАРМБИОПРОМ"
ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "ФАРМБИОПРОМ"
1127746214925
ГЕОРГИЙ
АЛЕКСАНДРОВ
ВАСИЛЬЕВИЧ
Организация
Организации, учрежденные юридическими лицами или гражданами, или юридическими лицами и гражданами совместно
Общества с ограниченной ответственностью