ШТАММ ESCHERICHIA COLI BL21(DE3)PLYSS/PET15B-HISCPF1 - ПРОДУЦЕНТ РНК-НАПРАВЛЯЕМОЙ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ CRISPR/CPF1
CRISPR/CPF1 CRISPR/CAS12A CRISPR/CAS CAS12A CPF1 РНК-НАПРАВЛЯЕМАЯ ДНК-ЭНДОНУКЛЕАЗА ГЕНОМНОЕ РЕДАКТИРОВАНИЕ
Сущность изобретения заключается в создании технологии высокоэффективной продукции активного рекомбинантного фермента Cpf1. На первом этапе при помощи методов генной инженерии была сконструирована рекомбинантная плазмидная ДНК pET15b-HisCpf1, несущая ген cpf1 из бактериального штамма Moraxella bovis. В качестве продуцента целевой эндонуклеазы был выбран штамм E.coli BL21(DE3)pLysS, клетки которого были трансформированы полученной рекомбинантной плазмидой. Выделенная из полученного штамма-продуцента рекомбинантная эндонуклеаза Cpf1 была очищена из клеточных лизатов методом металлохелатной хроматографии с последующим концентрированием и переносом белковой фракции в буфер для хранения. Показано, что очищенный препарат обладает эндонуклеазной активностью, при мольном соотношении ДНК:РНК/Cpf1 = 1:3 гидролиз модельной ДНК протекает на 100%.
Для генно-инженерных работ с вирусными, бактериальными ДНК и ДНК человека, животных и растений.
Сергей
Нетёсов
Викторович
Заведующий лабораторией
Доктор биологических наук
Академик
A-3751-2013
7003838873
79467
0000-0002-7786-2464
РОССИЯ
Дмитрий
Чуркин
Владимирович
проректор по научно-исследовательской деятельности
РОССИЯ
62.37.30
Получение трансгенных животных биотехнологическим методом
62.37.35
Вакцины, полученные методом генетической инженерии
62.37.29
Генетическая инженерия растений
01.06.CQ
BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
Валерия
Васиховская
Александровна
Выполнение основных экспериментов, руководство грантом УМНИК
РОССИЯ
Сергей
Нетёсов
Викторович
Общее руководство работой и обеспечение части ее финансирования
РОССИЯ
Маргарита
Романенко
Владимировна
Основная идея работы, участие в начальных экспериментах
РОССИЯ
МИНОБРНАУКИ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1187746579690
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
Новосибирский государственный университет; НГУ
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Новосибирский национальный исследовательский государственный университет"
1025403658565
Организация
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения