Способ определения субстратной эффективности производных трифосфатов дезоксиуридина для ДНК-полимераз методом реакции достраивания праймера.
SELEX, АПТАМЕРЫ, РЕАКЦИЯ ДОСТРАИВАНИЯ ПРАЙМЕРА, ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ, МОДИФИЦИРОВАННЫЕ НУКЛЕОЗИДТРИФОСФАТЫ
Заявлен способ определения субстратной эффективности производных трифосфатов дезоксиуридина для ДНК-полимераз методом реакции достраивания праймера на гомонуклеотидной матрице состоящей из 20 аденинов с фланкирующей (праймерной) частью, при полной замене природного дезокситимидинтрифосфата на модифицированный аналог, а также метода электрофоретического разделения высокого разрешения с оценкой длин продуктов реакции достраивания праймера, комплементарного фланкирующей части матрицы. В качестве критерия субстратной эффективности производных трифосфатов дезоксиуридина с ДНК-полимеразами приняты длины продуктов реакции достраивания праймера, которые образуются за время реакции. Использован метод кинетического контроля реакции достраивания праймера электрофоретическим анализом продуктов при различных временах реакции. Настоящее изобретение может быть использовано при получении модифицированных фрагментов ДНК и модифицированных аптамеров, функциональных аналогов моноклональных антител.
Настоящее изобретение относится к области молекулярной биологии, органической химии, биотехнологии, микробиологии и медицины и обеспечивает определение субстратной свойств производных 2`-дезоксиуридин-5`-трифосфатов и матричнозависимых ДНК-полимераз. Изобретение может быть использовано при получении модифицированных фрагментов ДНК, а также при получении высокоэффективных модифицированных аптамеров методом SELEX. Модифицированные аптамеры, по способности связываться с молекулярными мишенями являются функциональными аналогами, миметиками, белковых моноклональных антител, при этом сохраняют способность к амплификации как природные ДНК, что открывает широкие возможности их практического применения.
Чудинов А.В.
Эксперт по научным вопросам
Ипатова О. М.
Генеральный директор
34.15.15
Пространственная структура и свойства биополимеров
34.15.05
Методы и аппаратура в молекулярной биологии
31.23.29
Нуклеиновые кислоты и их компоненты
01.06.CQ
BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY
Сергей
Лапа
Анатольевич
конструирование праймеров, проведение ферментативных реакции
Сергей
Радько
Павлович
получение модифицированных одноцепочечных фрагментов ДНК в ходе реакции удлинения праймера
Валерий
Шершов
Евгеньевич
хроматографическая очистка модифицированных дезоксиуридинтрифосфатов
Вадим
Василисков
Александрович
проведение электрофоретического контроля
Александр
Чудинов
Васильевич
анализ литературных источников, синтез модифицированных дезоксиуридинтрифосфатов
Ринат
Мифтахов
Азатович
проведение электрофоретического контроля
Эдуард
Тимофеев
Николаевич
синтез модифицированных ДНК
Валерий
Заседателев
Евгеньевич
разработка концепции заявляемого способа
Андрей
Лисица
Валерьевич
разработка концепции заявляемого способа, анализ литературных источников
Виктория
Кузнецова
Евгеньевна
синтез модифицированных дезоксиуридинтрифосфатов
Минобрнауки России
Министерство образования и науки Российской Федерации
1047796287440
Организация
Министерство образования и науки Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ООО "ИБМХ-ЭкоБиоФарм"
Общество с ограниченной ответственностью "ИБМХ-ЭкоБиоФарм"
1107746445894
МИХАИЛ
ИПАТОВ
АЛЕКСАНДРОВИЧ
Организация
Организации, учрежденные юридическими лицами или гражданами, или юридическими лицами и гражданами совместно
Общества с ограниченной ответственностью