Способ определения поражения эндотелия кровеносных сосудов в эксперименте при гриппозной инфекции с использованием эндотелиальной синтазы нитроксидазота
поражения эндотелия кровеносных сосудов эндотелий кровеносных сосудов эндотелиальная синтаза нитроксидазота гриппозная инфекция
Изобретение относится к области медицины и биотехнологии, а именно к способу определения поражения эндотелия кровеносных сосудов в эксперименте при гриппозной инфекции с использованием эндотелиальной синтазы нитроксидазота, и может быть использовано в доклинических исследованиях. Способ заключается в том, что экспериментальных животных инфицируют вирусом гриппа А(H1N1)pdm09, после чего с парафиновых блоков легких и брыжейки экспериментальных животных изготавливают гистологические срезы кровеносных сосудов толщиной 4-5 мкм, которые помещают на предметные стекла с А(H1N1)pdm09. Затем определяют уровень экспрессии eNos в гистологических срезах иммуногистохимическим методом с использованием мышиных моноклональных антител, специфичных к eNos. При этом инкубацию срезов первичными антителами проводят на протяжении 1 часа при комнатной температуре во влажной камере. Для детекции исследуемого антигена в аутопсийном материале используют систему визуализации, включающую в себя реакцию с DAB хромогеном, а морфометрическую обработку полученных снимков проводят в программе Nis-ElementsBr 4,40 при постоянных настройках с использованием бинаризации по синему каналу в автоматическом режиме с постоянными значениями порога. Исследуют следующие параметры: площадь заполнения - площадь с сигналом в поле зрения; суммарную плотность - сумма отдельных оптических плотностей каждого пикселя в поле зрения, рассчитанная по формуле. Определение уровня экспрессии eNos осуществляют через 24 и 96 часов после инфицирования. Вывод о необратимом поражении кровеносных сосудов делают в случае увеличения экспрессии eNos в 10 и более раз по сравнению с контролем. Изобретение обеспечивает возможность определения необратимого поражения эндотелия кровеносных сосудов при гриппозной инфекции.
может быть использовано в доклинических исследованиях при определении поражения эндотелия кровеносных сосудов  при гриппозной инфекции
Ирина
Жилинская
Николаевна
ведущий научный сотрудник
Доктор биологических наук
Старший научный сотрудник
T-3154-2018
6602972221
6408-5235
https://www.influenza.spb.ru
0000-0002-0084-1323
РОССИЯ
Дмитрий
Лиознов
Анатольевич
Директор
РОССИЯ
76.03.41
Медицинская вирусология
01.06.ZE
VIROLOGY
Ирина
Жилинская
Николаевна
РОССИЯ
Владимир
Марченко
Александрович
РОССИЯ
Дмитрий
Лиознов
Анатольевич
РОССИЯ
МИНЗДРАВ РОССИИ
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
1127746460896
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные казенные учреждения
ФГБУ «НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева» Минздрава России
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт гриппа имени А.А. Смородинцева" Министерства здравоохранения Российской Федерации
1027806881827
Организация
Министерство здравоохранения Российской Федерации
Федеральные государственные бюджетные учреждения